Sådan tilberedes du bufferløsninger

Bufferløsninger modstår ændringer i pH, fordi de indeholder svage syre-base-konjugater, der neutraliserer H + og OH- ioner. Bufferopløsninger består af svage syrer eller baser og saltet af den syre eller base. Udvælgelse af et passende buffersystem afhænger af pH-området for buffering. De fleste biologiske reaktioner forekommer i et pH-område på 6 til 8. Fosfatbufferbuffere over pH-området på 6,5 til 7,5. Carboxylsyrebuffere er nyttige fra pH 3 til 6. Boratbuffere virker fra pH 8,5 til 10. Aminosyrebuffere, såsom glycin og histidin, udfører over en række forskellige pH-intervaller. Tris buffer er et af de mest anvendte buffer systemer i biologi labs. Beregninger for en Tris-bufferopløsning vil blive brugt i det følgende eksempel, men metoden gælder for enhver bufferopløsning.

Brug produktet af den endelige opløsnings molaritet og volumen til at bestemme mol base, der kræves. For eksempel, hvis der kræves 2 liter af en 0,1 M opløsning af Tris-buffer, er der behov for det antal mol Tris, der er påkrævet:

0,1 mol /liter x 2 liter = 0,2 mol Tris base

Beregn massen af ​​buffer, der kræves ved at multiplicere antallet af mol, der kræves af basisens molekylvægt. For eksempel er massen på 0,2 mol Tris base lig med:

0,2 mol Tris x 121,1 g /mol Tris = 24,22 g Tris

Mål den passende masse af base på en skala. >

Opløs basen i destilleret vand ved hjælp af en magnetisk omrøringsbjælke og omrør varmpladen. Opløs det i en mængde vand kun lidt mindre end den endelige opløsningsmængde (950 til 975 ml for hver liter slutopløsning). PH-værdien af ​​Tris-buffer ændres med koncentration og skal justeres, hvis der anvendes for lille et indledende volumen. Det er også bedst at forberede bufferen ved den samme temperatur, som den vil blive brugt under analysen eller eksperimentet, da Tris har store temperaturafhængige ændringer i pH.

Titrering af den vandige Tris-opløsning med 1 M saltsyre under anvendelse af en pH meter.

Tag opløsningen til slutvolumen med destilleret vand i en målekolbe.

Tip

For at spare tid ved forberedelse af en bufferopløsning kan du bruge præfabrikerede bufferkoncentrater ved den ønskede pH og fortyndes til ønsket molaritet og volumen.

Forbered pufferopløsning ved samme temperatur som det vil blive brugt til at undgå betydelige pH-ændringer.

Undgå tidskrævende pH-justeringer, titrer først efter fortynding til den ønskede koncentration. Opløsning i for lille et volumen vil medføre gentagne titreringer.

Advarsel

Vær forsigtig ved håndtering af syrer og baser.

Brug beskyttelsesbriller.