Videnskab
 science >> Videnskab >  >> Biologi

Fem trin til at forberede Agar skrå

Agar er et gelélignende stof, der stammer fra rensede cellevægge af røde alger. Det sættes til mikrobiologiske medier, som er materialer, hvorpå mikroorganismer dyrkes i laboratorier, for at give stoffet mere af en fast struktur. Agar har ingen næringsværdi, så når forskere bruger det til at dyrke mikroorganismer, tilsætter de forskellige næringsstoffer for at øge bakterievæksten i petriskåle eller reagensglas. Når forskere opbevarer bakterier i et reagensglas, kaldes det en agarhældning, fordi væskeformet medie stivner, mens røret er i en vippet position. En skruehætte på skråplanet forhindrer agaren i at udtørre.

  1. Medium tilberedning

    Mediet tilberedes forskelligt til skråskaller end petriskåle. Sterilisering udføres med agaren i rørene; petriskåle pre-steriliseres, før steriliseret agar hældes i dem. Mål den nødvendige mængde vand, og læg den i en Erlenmeyer-kolbe. Varm den op på en komfur, indtil den næsten koger. Tilsæt om nødvendigt andre ingredienser, og omrør blandingen langsomt og konstant, indtil de er opløst. Disse ingredienser kan omfatte oksekødekstrakt, pepton og pH-buffere, afhængigt af typen af mikroorganisme, der dyrkes.

  2. Tilføj Agar

    Inden du tilsætter det dehydrerede agarpulver, bland det med en lille mængde koldt destilleret vand for at forhindre klumpning. Vær forsigtig, når du tilsætter agar til den varme væske, da den kan skumme og overstrømme gryden. Tilsæt små mængder agar ad gangen og rør for at fordele agaren jævnt. Sluk for varmen, når blandingen begynder at dampe, inden den koger.

  3. Steriliseringsrør

    Placer de ikke-lukkede reagensglas på et reagensglasstativ. Fyld prøverørene ved at overføre ca. 5 ml - ca. 0,17 ounce eller 1 tsk - af den smeltede agar fra gryden ved hjælp af en steril pipette. Lås hvert testrør løst, fordi agaren ikke steriliseres, hvis de forsegles tæt. Steriliser alle rørene i en autoklav i cirka 25 minutter ved 121 grader eller 250 grader Fahrenheit.

  4. Opbevares skråtstillet

    Når agaren stadig er varm, vippes forsigtigt racket, der holder prøverørene på en fast overflade eller en tyk bog, og sørg for, at mediet inde i rørene er i en skrå position i forhold til reagensglassene. Lad mediet køle af og størkne i denne vinkel, hvilket øger agarens overfladeareal. Spænd kapperne på prøverørene, når agaren er afkølet. Skråene er klar til brug, når agaren er størknet. De kan opbevares ved stuetemperatur eller i køleskabet til fremtidig brug.

  5. Inokulere skråplanet

    Inokulere skråstillingen ved at overføre celler med en inokuleringssløjfe fra en mikrokultur med en koloni på en plade på skrå overfladen. Flyt løkken hen over skråfladen, og sæt rørene sammen. Inkuber skråben, indtil der er tegn på vækst, og sæt derefter røret i køleskab.