Faktorer, der påvirker RF-værdier i tyndtlagskromatografi

Under tyndtlagskromatografi placerer en tekniker pletter af en kemisk blanding på en flad plade belagt med et lag absorberende materiale og sætter derefter den nederste del af pladen i opløsningsmiddel. Når opløsningsmidlet bevæger sig op ad pladen, bevæger kemikalier i blandingen sig op med den i forskellige hastigheder, så de adskilles. Denne test bestemmer, hvilke kemikalier der er i en blanding ved at sammenligne rejsepriserne for ukendte med kendte standarder. Resultaterne kan dog blive påvirket af mange faktorer.

TL; DR (for lang; læste ikke)

Værdien af tilbageholdelsesfaktorer i tyndtlagskromatografi påvirkes af absorbenten, opløsningsmiddel, selve kromatografipladen, påføringsteknik og temperaturen på opløsningsmidlet og pladen. som svar på opløsningsmidlets bevægelse. Da kemikaliens absolutte bevægelse afhænger af, hvor langt opløsningsmidlet bevæger sig, beregner du retensionsfaktorværdier i forhold til graden af opløsningsmiddelbevægelse. Opbevaringsfaktoren for et kemikalie er den vertikale afstand, der flyttes af kemikaliet fra det sted, hvor det oprindeligt blev anvendt på pladen, divideret med afstanden, som opløsningsmidlet har rejst - målt fra det samme udgangspunkt.
Thin Layer Chromatography Plate

Selve tyndtlagskromatografipladen kan påvirke den tilbageholdelsesfaktorværdi, der opnås for et givet kemikalie. Tyndtlagskromatografiplader kan coates med en række forskellige absorberende faste stoffer; hyppigst silica eller aluminiumoxid. Da tilbageholdelsesfaktoren er baseret på den relative affinitet af kemikaliet for det absorberende stof sammenlignet med opløsningsmidlet, kan ændring af det absorberende stof i høj grad ændre tilbageholdelsesfaktoren. Tykkelsen og ensartetheten af det absorberende lag kan også variere fra plade til plade, især hvis de er håndlavede. Disse faktorer kan også ændre tilbageholdelsesfaktorværdien for kemikalier.
Solvent Impacts Retention Factors

Da opløsningsmidlet bærer kemikaliet op på pladen, vil det anvendte opløsningsmiddel også have en betydelig indflydelse på værdien af tilbageholdelsesfaktor for kemikaliet. Et opløsningsmiddel, der har en stærkere interaktion for et bestemt kemikalie, vil lettere overvinde enhver affinitet af kemikaliet for det absorberende lag og flytte det kemikalie længere i et givet tidsrum. Blandinger af opløsningsmidler kan også have forskellige effekter afhængigt af andelen af hvert opløsningsmiddel.
Andre faktorer

Der er et par andre faktorer, der kan påvirke retentionsfaktoren i nogle tilfælde. Opløsningsmidlets og pladens temperatur kan foretage små ændringer, da opløsningsmidlet for eksempel ofte bedre kan opløse kemikalierne, det transporterer ved højere temperaturer. Teknikerens teknik til påføring af prøven på pladen kan også ændre tilbageholdelsesfaktoren. Anvendelse af for meget prøve kan resultere i store, diffuse bånd af kemikalie, der bevæger sig op ad pladen, hvilket gør det vanskeligt at måle den afstand, kemikaliet er blevet transporteret nøjagtigt.