Hvad er en kemisk test for protein?

Der er flere kemiske test, der bruges til at detektere tilstedeværelsen af ​​proteiner, hver med sine egne fordele og begrænsninger. Her er et par af de mest almindelige:

1. Biuret -test:

* princip: Denne test registrerer tilstedeværelsen af ​​peptidbindinger, som er sammenhængen mellem aminosyrer i proteiner.

* Procedure:

* Tilsæt et par dråber biuretreagens (en opløsning af kobbersulfat i en stærk alkali) til prøven.

* En violet-blå farve indikerer et positivt resultat, der bekræfter tilstedeværelsen af ​​proteiner.

* Fordele: Relativt følsom og vidt brugt.

* Ulemper: Ikke specifikt for proteiner, da andre forbindelser, der indeholder peptidbindinger, også kan give en positiv reaktion.

2. Ninhydrin -test:

* princip: Denne test registrerer tilstedeværelsen af ​​a-aminogrupper, der er til stede i alle aminosyrer.

* Procedure:

* Varm prøven med ninhydrin -reagens.

* En lilla-blå farve indikerer et positivt resultat, der indikerer tilstedeværelsen af ​​frie aminogrupper.

* Fordele: Meget følsom og kan registrere meget små mængder aminosyrer.

* Ulemper: Ikke specifikt for proteiner, da andre forbindelser, der indeholder a-aminogrupper, også kan reagere.

3. Xanthoproteic test:

* princip: Denne test registrerer tilstedeværelsen af ​​aromatiske aminosyrer som tyrosin og tryptophan.

* Procedure:

* Tilsæt koncentreret salpetersyre til prøven.

* Varm blandingen forsigtigt.

* En gul farve indikerer et positivt resultat, der indikerer tilstedeværelsen af ​​aromatiske aminosyrer.

* Tilsætning af ammoniak forbedrer farven til orange-gul til orange-gul.

* Fordele: Relativt specifikt for proteiner, der indeholder aromatiske aminosyrer.

* Ulemper: Ikke så følsom som andre tests.

4. Millons test:

* princip: Denne test detekterer tilstedeværelsen af ​​tyrosin, en aromatisk aminosyre.

* Procedure:

* Tilføj Millons reagens (en opløsning af kviksølvnitrat i salpetersyre) til prøven.

* Varm blandingen forsigtigt.

* Et hvidt bundfald, der bliver rødt ved opvarmning, indikerer et positivt resultat, der bekræfter tilstedeværelsen af ​​tyrosin.

* Fordele: Relativt specifikt for tyrosin, en almindelig aminosyre i proteiner.

* Ulemper: Ikke så følsom som andre tests.

5. Bradford Assay:

* princip: Dette er et kolorimetrisk assay, der måler proteinkoncentrationen i en prøve ved hjælp af et farvestof, der binder til proteiner.

* Procedure:

* Bland prøven med Coomassie Brilliant Blue Dye.

* Farvestoffet binder til proteinet, hvilket resulterer i en farveændring, der kan måles ved hjælp af et spektrofotometer.

* Fordele: Meget følsom og nøjagtig, vidt anvendt til proteinkvantificering.

* Ulemper: Kræver et spektrofotometer og kan påvirkes af visse vaskemidler.

Valg af den rigtige test:

Den bedste test for en bestemt situation afhænger af faktorer som:

* Følsomhed: Hvor meget forventes protein i prøven?

* specificitet: Har du brug for at detektere en specifik type protein eller bare protein?

* ressourcer: Har du adgang til de nødvendige reagenser og udstyr?

Det er ofte en god ide at bruge flere tests til at bekræfte tilstedeværelsen af ​​proteiner og få en mere komplet forståelse af deres sammensætning.