Sådan fungerer det:
1. svovlreduktion: Nogle bakterier har enzymer, der kan reducere svovlholdige forbindelser som thiosulfat (til stede i SIM-agar) til hydrogensulfid (H₂S) gas.
2. reaktion med FAS: H₂S -gassen produceret af bakterierne reagerer med det jernholdige ammoniumsulfat i mediet.
3. sort bundfald: Denne reaktion resulterer i dannelsen af et sort bundfald af jernsulfid (FES) .
4. visuel indikation: Tilstedeværelsen af dette sorte bundfald langs inokulationslinjen i SIM -agaren indikerer, at bakterien er i stand til at reducere svovl og producere hydrogensulfid.
Sammenfattende fungerer jernholdigt ammoniumsulfat som en indikator i SIM -agar, hvilket muliggør visualisering af hydrogensulfidproduktion af bakterier.