Hvad er en fri eller bevægende grænseelektroforese?

Gratis eller bevægende grænseelektroforese

Gratis eller bevægende grænseelektroforese er en type elektroforese -teknik, der er afhængig af bevægelsen af ​​en skarp grænse Mellem en opløsning, der indeholder analytten (indholdet af interesse) og en bufferopløsning . Denne teknik blev udviklet af arne Tiselius I 1930'erne og tjente ham Nobelprisen i kemi i 1948 .

Sådan fungerer det:

1. forberedelse: En opløsning, der indeholder analytten, er lagdelt på toppen af ​​en pufferopløsning i et lodret glasrør. De to løsninger har forskellige brydningsindeks, hvilket skaber en synlig grænse.

2. Elektroforese: Et elektrisk felt påføres på tværs af røret. De ladede analytmolekyler migrerer mod elektroden med den modsatte ladning.

3. migration: Analytmolekylerne bevæger sig gennem bufferopløsningen og skaber en bevægende grænse der kan observeres ved hjælp af schlieren optik . Denne teknik bruger let refraktion til at visualisere grænsen og måle dens bevægelse.

4. Analyse: migrationshastigheden af grænsen er proportional med analysens elektroforetisk mobilitet , som bestemmes af dens opladning og størrelse. Disse oplysninger kan bruges til at identificere og kvantificere forskellige komponenter i analytblandingen.

Nøglefunktioner ved fri eller bevægende grænseelektroforese:

* Intet understøttende medium: Analytten migrerer gennem en flydende buffer, i modsætning til andre elektroforese -teknikker, der bruger geler eller membraner.

* skarp grænse: Tilstedeværelsen af ​​en distinkt grænse muliggør præcis måling af analytens migration.

* Kvantitativ analyse: Teknikken er velegnet til kvantitativ analyse af forskellige komponenter i en blanding.

* Begrænset opløsning: Sammenlignet med andre elektroforeseteknikker har bevægelseselektroforese af grænse for at adskille komplekse komplekse blandinger.

Ansøgninger:

* Proteinkarakterisering: Bestemmelse af renheden og homogeniteten af ​​proteinopløsninger.

* isoelektrisk fokusering: Identificering af det isoelektriske punkt af proteiner.

* serumproteinanalyse: Undersøgelse af sammensætningen af ​​serumproteiner i kliniske anvendelser.

Begrænsninger:

* Begrænset opløsning: Sammenlignet med andre teknikker har det en lavere opløsningsevne til komplekse blandinger.

* tekniske udfordringer: Kræver specialiseret udstyr og præcise eksperimentelle forhold.

* tidskrævende: Processen kan være relativt tidskrævende.

Moderne teknikker:

Mens fri eller bevægende grænseelektroforese var et betydeligt gennembrud i sin tid, er det stort set blevet erstattet af mere sofistikerede og alsidige elektroforese -teknikker, såsom gelelektroforese og kapillær elektroforese . Disse teknikker tilbyder højere opløsning, enklere drift og bredere anvendelighed.

Imidlertid forbliver den historiske betydning af fri eller bevægende grænseelektroforese, da den banede vejen for udviklingen af ​​moderne elektroforese -teknikker, der er vidt brugt på forskellige områder i dag.