Det er dog vigtigt at huske, at dette er en teoretisk værdi. Den faktiske frie energiændring kan variere afhængigt af:
* Koncentration af reaktanter og produkter: Jo mere ATP og vand til stede, jo mere gunstig bliver reaktionen.
* ph: Den optimale pH til ATP -hydrolyse er omkring 7.
* tilstedeværelse af mg²⁺: Magnesiumioner binder til ATP, øger dens stabilitet og reducerer den frie energiændring lidt.
* Temperatur: Den frie energiændring bliver mere negativ ved højere temperaturer.
Derfor kan den frie energiændring af ATP -hydrolyse i en levende celle være lidt forskellig fra -30,5 kJ/mol.
Vigtig note: Hydrolyse af ATP til ADP inkluderer ofte frigivelse af et uorganisk phosphat (PI), så reaktionen er ofte repræsenteret som:
ATP + H₂O → ADP + PI