Ved glykolyse produceres G3P ud fra dihydroxyacetonephosphat (DHAP) af enzymet triosephosphatisomerase. DHAP og G3P er isomerer, hvilket betyder, at de har den samme molekylære formel, men forskellige strukturer. Triosephosphatisomerase katalyserer indbyrdes omdannelse af disse to molekyler.
G3P kan også fremstilles ud fra glycerol af enzymet glycerol kinase. Glycerol er en alkohol med tre carbonatomer, der findes i fedtstoffer og olier. Glycerolkinase katalyserer phosphoryleringen af glycerol til dannelse af G3P.
G3P er et substrat for flere forskellige enzymer, herunder:
* Glyceraldehyd 3-phosphat dehydrogenase (GAPDH) katalyserer oxidationen af G3P til 1,3-bisphosphoglycerat (1,3-BPG). Denne reaktion er koblet til reduktionen af NAD+ til NADH.
* Phosphoglycerat kinase (PGK) katalyserer overførslen af en fosfatgruppe fra 1,3-BPG til ADP og danner 3-phosphoglycerat (3-PG) og ATP.
* Phosphoglyceromutase (PGM) katalyserer interkonverteringen af 3-PG og 2-phosphoglycerat (2-PG).
* Enolase katalyserer dehydreringen af 2-PG til dannelse af phosphoenolpyruvat (PEP).
G3P er et vigtigt molekyle i flere metaboliske veje. Det er et substrat for flere forskellige enzymer, og det er involveret i produktionen af ATP, NADH og andre vigtige metabolitter.