Hvordan fremstiller du 0,02M natriumphosphatbuffer af pH 6,9 med 0,006M NaCI?

forståelse af det grundlæggende

* natriumphosphatbuffer: Denne buffer fremstilles typisk under anvendelse af en blanding af monobasisk natriumphosphat (NAH2PO4) og dibasisk natriumphosphat (Na2HPO4). Disse to komponenter fungerer som et konjugeret syre-basepar, hvilket gør det muligt for opløsningen at modstå ændringer i pH.

* pH 6,9: Den ønskede pH for din buffer. Dette vil bestemme forholdet mellem NaH2PO4 og Na2HPO4 nødvendigt.

* 0,006 M NaCl: Dette er simpelthen en saltopløsning tilsat til bufferen. Det påvirker ikke direkte pufferens pH, men kan bruges til specifikke eksperimentelle behov.

trin for at forberede bufferen

1. Beregn de krævede masser:

* Bestem PKA: Den relevante PKA for phosphatbuffer er 7,21 (PKA for H2PO4- / HPO42- ligevægt). Dette er tæt på den ønskede pH, hvilket gør det til et godt valg.

* Brug Henderson-Hasselbalch-ligningen:

* ph =pka + log ([hpo42-] / [h2po4-])

* 6.9 =7.21 + log ([HPO42-] / [H2PO4-])

* Løs for forholdet:[HPO42-] / [H2PO4-] =0,50

* Beregn molariteten for hver fosfatkomponent:

* Samlet phosphatmolaritet =0,02 m

* [Na2hpo4] =0,02 m * (0,50 / 1,50) =0,0067 m (ca.

* [NAH2PO4] =0,02 M * (1,00 / 1,50) =0,0133 m (ca.

* Konverter molariteter til gram:

* Du har brug for molekylvægte af NaH2PO4 (119,98 g/mol) og Na2HPO4 (141,96 g/mol).

* Beregn den nødvendige masse til hver komponent ved hjælp af følgende formel:masse =(molaritet * Volumen * Molekylvægt) / 1000

* For eksempel for NAH2PO4, hvis du vil lave 1 L Buffer:

* Masse =(0,0133 mol/l * 1 L * 119,98 g/mol)/1000 =1,59 g

* Beregn massen af ​​Na2HPO4 på lignende måde.

2. Opløs salte i vand:

* Vej de beregnede mængder af NaH2PO4 og Na2HPO4.

* Opløs dem i ca. 800 ml destilleret vand.

* Tilføj den beregnede masse af NaCl til opløsningen, og omrør for at opløses.

* Brug en magnetisk omrører eller omrør stangen for at sikre grundig blanding.

3. Juster pH (valgfrit):

* Brug en pH -meter til at kontrollere pH i opløsningen.

* Hvis pH ikke er nøjagtigt 6,9, kan du justere den lidt ved at tilføje små mængder af enten 1 M HCI (for at sænke pH) eller 1 m NaOH (for at hæve pH). Tilføj disse opløsninger dråbevis, mens du overvåger pH med en meter.

4. Medbring løsningen til det endelige bind:

* Når pH er justeret, tilsættes omhyggeligt destilleret vand omhyggeligt for at bringe det samlede volumen af ​​opløsningen til 1 L.

5. Kontroller og opbevares:

* Kontroller pH en gang til for at sikre, at den er korrekt.

* Opbevar din buffer ved stuetemperatur eller i køleskab til længere opbevaring.

Vigtige overvejelser

* Vandkvalitet: Brug destilleret vand af høj kvalitet til de bedste resultater.

* Nøjagtighed: Vej nøjagtigt salte for at sikre den korrekte bufferkoncentration.

* pH meter kalibrering: Kalibrer din pH -meter korrekt inden brug til nøjagtige målinger.

* sikkerhed: Bær altid passende sikkerhedsudstyr (handsker, beskyttelsesbriller), når du håndterer kemikalier.

Denne procedure skal give dig en 0,02 M natriumphosphatbufferopløsning ved pH 6,9 med 0,006 M NaCI. Husk at justere volumener og beregninger, hvis du har brug for at lave en anden mængde buffer.