Evaluering af P22 mAbs ved Western blot-analyse og blokerende enzym-linked immunosorbent assay (ELISA). A) Western blot-analyse af P22-monoklonale antistoffers (mAbs) specificitet over for det målrettede P22-protein. Blokbogstavet mellem to tal i det nederste hjørne af hvert billede repræsenterer navnet på mAb, KDa =kilo Dalton, M =markør, bane-1 =rekombinant P22-protein fyldt med 15 µl ved en koncentration på 1 mg/ml og bane- 2 =maltosebindende protein (MBP) som en negativ kontrol. Disse resultater viste, at alle mAb'erne var meget specifikke og genkendte det MBP-mærkede P22-protein ved den forventede vægt på omkring 66 KDa. B) Evaluering af syv P22-mAbs (3B7, 3F6, 3F7, 3F8, 3E9, 4A6 og 4B6) for deres anvendelse til blokering af ELISA ved brug af seks positive og fire negative svineserumprøver til afrikansk svinepestvirus (ASFV) og dem alle blev inhiberet til at binde deres målcoatede antigen af de positive serumprøver med gennemsnitlig PI> 92%. Data repræsenterer gennemsnittet af resultaterne fra tre uafhængige eksperimenter. Kredit:Biosikkerhed og sundhed (2022). DOI:10.1016/j.bsheal.2022.04.002
Afrikansk svinepest (ASF) er en meget smitsom og dødelig sygdom hos grise. På grund af kompleksiteten af ASF-virus (ASFV) og forskellige kliniske former for sygdommen er en bred vifte af yderst effektive og robuste sero-diagnostiske assays påkrævet.
Anvendelsen af de mest antigene ASFV-proteiner er yderst afgørende for at forbedre sero-diagnostiske assays. I øjeblikket er kun få meget antigene rekombinante proteiner blevet testet og valideret til brug som reagenser i ASF sero-diagnostiske assays. Indtil videre er tre ELISA-sæt baseret på de rekombinante proteiner P72, P30 og PP62 blevet godkendt.
I en ny undersøgelse offentliggjort i Biosafety and Health baseret på det rekombinante P22-protein blev et meget følsomt, specifikt og hurtigt P22 monoklonalt antistofbaseret blokerende ELISA (mAb-bELISA) assay udviklet til at påvise serumantistoffer induceret af genotype I og II ASFV'er til at påvise ASFV-antistoffer. I alt 806 griseserumprøver blev testet for at evaluere ydeevnen af det diagnostiske assay. Analysen var i stand til at påvise ASFV-antistoffer så tidligt som 9 dage efter infektion.
Baseret på denne undersøgelse kan det nye P22-mAb-baserede bELISA-assay bruges til hurtig og nøjagtig påvisning af antistoffer mod ASFV, som vil spille en værdifuld rolle i indeslutningen og forebyggelsen af ASF som et alternativ til andre serologiske diagnostiske metoder. Denne undersøgelse vil også hjælpe forskere til yderligere at undersøge den immunogene betydning af P22-proteinet i ASFV-infektion. + Udforsk yderligere