Hvad er lodret gelelektroforese -enhed?

lodret gelelektroforeseenhed:en separationsmaskine

En lodret gelelektroforese -enhed er en anordning, der anvendes i molekylærbiologi og biokemi til separate molekyler, primært proteiner og nukleinsyrer (DNA og RNA) , baseret på deres størrelse og opladning .

Her er en oversigt over dens nøglefunktioner:

1. Komponenter:

* gelstøbningsbakke: Dette indeholder gelen, som er en porøs matrix, der fungerer som separationsmediet.

* glasplader: To lodrette glasplader sandwich gelen, hvilket skaber en smal kanal til prøvevandring.

* bufferkamre: Disse indeholder elektroforese -bufferen, der udfører elektricitet og opretholder systemets pH.

* Elektroder: Et par elektroder (anode og katode) genererer et elektrisk felt, der driver molekylerne gennem gelen.

* strømforsyning: Tilvejebringer en jævnstrøm til elektroderne og skaber det elektriske felt til adskillelse.

* kam: Dette bruges til at skabe brønde i gelen, hvor prøver indlæses.

2. Arbejdsprincip:

* Gelen er typisk lavet af polyacrylamid (Side) eller agarose , med forskellige tætheder til at kontrollere porestørrelse.

* Prøver indlæses i brønde øverst på gelen.

* Når der påføres et elektrisk felt, vandrer molekyler gennem gelen mod elektroden med den modsatte ladning (positivt for negativt ladede molekyler og omvendt).

* mindre molekyler migrerer hurtigere Gennem gelens porer, mens større molekyler støder på mere modstand og bevæger sig langsommere.

* Dette resulterer i separationsbånd Baseret på størrelse med de mindste molekyler i bunden og den største øverst.

3. Ansøgninger:

* Proteinanalyse: Bestemmelse af proteinstørrelse, renhed og tilstedeværelse.

* DNA -analyse: Sekventering, analyse af restriktionsfragment længde polymorfisme (RFLP) og kloning.

* RNA -analyse: Evaluering af genekspression og undersøgelse af RNA -struktur.

4. Fordele:

* Høj opløsning: Tilvejebringer klar adskillelse af molekyler med forskelle i let størrelse.

* alsidighed: Velegnet til forskellige typer prøver og applikationer.

* Kvantitativ analyse: Båndintensitet kan bruges til at måle mængden af ​​hvert molekyle.

5. Begrænsninger:

* kompleks opsætning: Kræver omhyggelig forberedelse og opmærksomhed på detaljer.

* tidskrævende: Elektroforeseprocessen kan tage flere timer.

* Begrænset kapacitet: Gelstørrelsen begrænser antallet af prøver, der kan køres samtidig.

Generelt er den lodrette gelelektroforeseenhed et vigtigt værktøj for forskere på forskellige felter, hvilket giver værdifuld indsigt i sammensætningen og egenskaberne ved biologiske molekyler.