1. Princippet:
* Biuret -testen er afhængig af reaktionen mellem kobberioner (Cu²⁺) i en alkalisk opløsning med peptidbindinger, der findes i proteiner.
* Peptidbindinger er forbindelserne mellem aminosyrer, der udgør proteiner.
* Når kobberioner binder til peptidbindingerne, danner de et kompleks, der absorberer lys ved en bestemt bølgelængde og producerer en tydelig farveændring.
2. Procedure:
* Tilføj en lille mængde af den ukendte prøve (væske eller fast) til et reagensglas.
* Tilføj et par dråber biuretreagens til prøven. Biuret -reagens er en opløsning, der indeholder kobbersulfat og natriumhydroxid.
* Bland indholdet af reagensglas forsigtigt.
* observer farveændringen.
3. Resultatfortolkning:
* positivt resultat: Hvis løsningen bliver violet eller lilla , det indikerer tilstedeværelsen af proteiner.
* negativt resultat: Hvis opløsningen forbliver blå eller ikke viser nogen signifikant farveændring, antyder den fraværet af proteiner.
4. Begrænsninger:
* Biuret -testen er ikke specifik for proteiner og kan også give et positivt resultat for forbindelser, der indeholder peptidbindinger, som peptider og nogle andre molekyler.
* Testen er muligvis ikke følsom nok til at detektere meget lave koncentrationer af proteiner.
5. Andre proteinforsøg:
Mens Biuret -testen er vidt brugt, er andre proteinforsøg også tilgængelige, såsom:
* ninhydrin -test: Detekterer tilstedeværelsen af aminosyrer, som er byggestenene for proteiner.
* xanthoproteisk test: Detekterer tilstedeværelsen af aromatiske aminosyrer, såsom tyrosin og tryptophan.
* Millons test: Detekterer tilstedeværelsen af tyrosin, en aminosyre, der findes i mange proteiner.
Valget af test afhænger af det specifikke protein, der undersøges, og det ønskede følsomhedsniveau.