Hvad er LB -plade ved at fremstille kompetente celler?

1. Vækstmedium: LB-agar giver et næringsrigt miljø for bakterier at vokse og formere sig. Det indeholder essentielle næringsstoffer som tryptone, gærekstrakt og natriumchlorid, der understøtter bakterievækst og opdeling.

2. Valg og identifikation: LB -plader kan suppleres med specifikke antibiotika, såsom ampicillin eller kanamycin. Dette muliggør valg af bakteriekolonier, der er transformeret med et plasmid indeholdende antibiotikaresistensgenet. Kun bakterierne, der bærer plasmidet, overlever på den antibiotikumholdige LB-plade, hvilket muliggør identifikation af med succes transformerede celler.

I processen med at fremstille kompetente celler bruges LB -plader til:

* voksende bakterier: Startbakterierne dyrkes først på LB -plader for at opnå et stort antal celler.

* Valg af transformerede celler: Efter transformation er bakterierne udpladet på LB -plader, der indeholder det passende antibiotikum. Kun de transformerede celler, der bærer resistensgenet, vil vokse og danne kolonier.

Nøgleaspekter af LB -plader ved fremstilling af kompetente celler:

* sammensætning: LB -agar indeholder typisk 1% tryptone, 0,5% gærekstrakt, 1% NaCl og 1,5% agar.

* Temperatur: LB -plader inkuberes normalt ved 37 ° C, den optimale temperatur for bakterievækst.

* Antibiotisk selektion: Det anvendte specifikke antibiotikum afhænger af det plasmid, der bruges til transformation.

* Koloniforannelse: Efter inkubation vil transformerede bakterier danne synlige kolonier på LB -pladen, som derefter kan analyseres yderligere.

Kortfattet: LB -plader tilvejebringer et passende medium til bakterievækst og giver mulighed for valg af transformerede celler baseret på antibiotikaresistens. De er et vigtigt værktøj i processen med at fremstille kompetente celler til genkloning og andre molekylære biologi -teknikker.