Nøjagtig celletælling under mikroskopet:teknikker, udstyr og anvendelser

Af Kevin Beck | Opdateret 30. august 2022

Celler er livets grundlæggende enheder, der hver indeholder DNA, en membran, cytoplasma og ribosomer. De danner grundlaget for alle levende organismer – fra enkeltcellede bakterier til komplekse flercellede eukaryoter. Forståelse og kvantificering af celler er afgørende i forskning, diagnostik og folkesundhed.

Hvad er celler?

Celler indeholder fire kernekomponenter:DNA (den genetiske plan), en plasmamembran, cytoplasma og ribosomer til proteinsyntese. Prokaryoter (bakterier og archaea) mangler membranbundne organeller, mens eukaryoter (dyr, planter, svampe) har organeller som mitokondrier og kloroplaster. Disse strukturelle forskelle muliggør enkel identifikation under et mikroskop.

Hvorfor tælle celletæthed?

Måling af celletæthed informerer os om, hvorvidt en prøve indeholder skadelige mikrober og i givet fald hvor mange. Disse data guider beslutninger inden for klinisk diagnostik, fødevaresikkerhed og miljøovervågning. For eksempel skal mejeriproducenter overholde lovgivningsmæssige grænser for bakteriemængder for at sikre produktsikkerhed.

Typer af mikroskoper

Det sammensatte lysmikroskop – der bruger to objektiver – giver høj forstørrelse til enkeltcelleanalyse, men lavere opløsning, hvilket gør det ideelt til at tælle individuelle celler. I modsætning hertil tilbyder et dissektion eller stereomikroskop lavere forstørrelse med højere opløsning, velegnet til at undersøge celleaggregater. Valg af det rigtige mikroskop afhænger af prøvetypen og det påkrævede synsfelt.

Celleoptællingsmetoder

Tre hovedmetoder anvendes i mikrobiologi:

• Pladerantal – Fortynding af en prøve, spredning af den på agar og optælling af kolonier for at estimere levedygtige celler.
• Direkte celletælling – Manuel optælling af celler i et kendt volumen, ofte ved hjælp af geometriske beregninger.
• Turbiditetsmåling – Vurdering af lysspredning for at estimere cellekoncentration, nyttig til højdensitetskulturer.

Disse teknikker er afhængige af præcise fortyndinger og videnskabelig notation på grund af den store række af organismenumre.

Forberedelse af et mikroskoptællekammer

Et hæmocytometer – oprindeligt designet til blodcelletælling – giver et standardiseret kammer til nøjagtig celleoptælling. Rengør kammeret før hver brug for at eliminere kontaminering og sikre reproducerbare resultater. Selvom der findes automatiserede tællere, er et velholdt hæmocytometer stadig en guldstandard for mange laboratorier.