Måling af hæmningszonen:En praktisk guide til testning af antibiotikafølsomhed

Af Elliot Walsh, Opdateret 24. marts 2022

Bakterier er planetens mest produktive organismer med over en billion art og mere end fem millioner billioner billioner enkeltpersoner. Selvom mindre end 1 % af disse mikrober forårsager sygdom hos mennesker, kan de variere fra mild maveforstyrrelse til livstruende infektioner som byllepesten, der dræbte anslået 50 millioner mennesker i det 14. århundrede.

Antibiotika og deres virkningsmekanismer

Antibiotika retter sig selektivt mod bakterielle strukturer og processer og skåner menneskelige celler. Almindelige klasser omfatter:

• Beta-lactamer (f.eks. penicillin) forstyrrer cellevægssyntesen, hvilket fører til bakteriel lysis.
• Makrolider (f.eks. erythromycin) binder bakterielle ribosomer, blokerer proteinsyntesen.
• Quinoloner interferere med DNA-replikation ved at hæmme gyrase og topoisomerase IV.

Test af antibiotikaresistens

Siden 1920'erne har bakterier udviklet resistens, hvilket har foranlediget udviklingen af standardiserede følsomhedsanalyser. Tidlige metoder involverede serielle fortyndinger af bakteriekulturer på antibiotikumfyldte plader, som var tidskrævende og varierende.

Kirby-Bauer Disk Diffusion Test

Standardiseret af mikrobiologerne W.M.M.Kirby og A.W.Bauer, er Kirby-Bauer-testen fortsat guldstandarden for hurtig, pålidelig resistensscreening. Fremgangsmåden er ligetil:

1. Strøg et rent bakterieisolat ud på en agarplade.
2. Placer antibiotika-fyldte skiver på overfladen; hver disk indeholder et specifikt antibiotikum.
3. Inkuber pladen under optimale forhold.

Når antibiotikummet diffunderer udad, hæmmes modtagelige bakterier, hvilket skaber et klart, cirkulært område uden vækst omkring hver skive - kendt som hæmningszonen. Størrelsen af ​​denne zone afspejler direkte bakteriel følsomhed:større zoner indikerer større modtagelighed; mindre zoner tyder på modstand.

Måling af hæmningszonen

Nøjagtig måling er afgørende for fortolkning af resultater. Følg disse trin:

1. Placer agarpladen på en ikke-reflekterende overflade.
2. Brug en millimeterlineal eller skydelære til at placere nul-mærket i midten af antibiotikumskiven.
3. Mål fra diskens centrum til yderkanten af hæmningszonen (radius). Multiplicer med to for at få diameteren, eller mål direkte på tværs af zonen (diameter).

Alle mål skal registreres i millimeter (mm).

Brug CLSI-referencetabellerne til at fortolke diameteren i forhold til bakteriearter og antibiotikum. Disse diagrammer kan findes her .