Microseeding:En ny måde at overvinde hemihedral twinning?

Twinning er en krystalvækstforstyrrelse, hvor prøven består af forskellige domæner, hvis orientering er forskellig, men er relateret til en bestemt, veldefineret måde. Venskab, som er et kendt problem inden for proteinkrystallografi, hæmmer sædvanligvis højkvalitets krystalstrukturbestemmelse, medmindre det detekteres og enten undgås eller korrigeres. Selvom der er udviklet effektive beregningsmetoder til bestemmelse af strukturer ved hjælp af data fra tvillingekrystaller (kendt som 'detwinning'), hvis det er muligt, er det at foretrække at få krystaller, der ikke er tvinnet. I nogle tilfælde, optimering af længden af ​​proteinfragmentet, der bruges til krystallisation, kan føre til vækst af ufortyndede krystaller, men dette er en tidskrævende proces.

I et nyligt papir i Acta Crystallographica Afsnit F , mikrofrø blev brugt til at producere ufortyndede krystaller af LigM, en O-demethylase fra Sphingobium sp. SYK-6, ved hjælp af tvillingekrystaller som frø. Mikrofrø er en af ​​flere såningsteknikker, der bruges til med succes at adskille nukleationshændelser fra krystalvæksthændelser. I denne teknik, krystaller bruges som frø og indføres i nye dråber, der ækvilibreres ved lavere niveauer af overmætning. Det er ofte blevet brugt til at forbedre reproducerbarheden ved krystallisation og kan give forskellige krystalformer.

I arbejdet beskrevet af Harada et al., omkring 50% af de oprindeligt opnåede krystaller af LigM blev hemihedrisk tvinnet. Disse krystaller blev derefter brugt som en frøbestand til mikrofrø. I kombination med optimering af reservoiropløsningen, dette førte til krystaller, der ikke blev tvillinget og tilhørte en anden rumgruppe. Det håbes, at denne metode vil have potentiale som en mere generel enkel metode til at overvinde hemihedralt twinning i proteinkrystaller.