Sådan måles den optimale temperatur for et enzym

Et enzym er et protein, der katalyserer (øger mængden af) kemiske reaktioner. Den optimale temperatur på de fleste enzymer, eller den temperatur, hvor enzymer bedst muliggør reaktioner, ligger mellem 35 og 40 grader Celsius. Øget temperatur inden for dette vindue øger reaktionshastigheden, fordi det exciterer molekyler og øger den hastighed, hvormed enzymer /reaktanter kolliderer og reagerer på fremstilling af produktet. Men stigende temperatur for meget kan denaturere enzymet og forhindre det i at fungere overhovedet.

Bestem den optimale enzymtemperatur ved at opvarme reaktionen ved uendelige mængder og tage små prøver af reaktionen for at bestemme, hvornår den maksimale hastighed på Producerende produkt opstår.

Vælg en metode. Bestem, hvordan du måler koncentrationen af ​​dit produkt på forskellige punkter i eksperimentet. For eksempel kan du måle koncentrationen af ​​mange produkter ved hjælp af et spektrofotometer og beregne koncentrationen fra absorbansen eller ved at måle fluorescens og beregningskoncentration fra fluorescens.

Konfigurer dit eksperiment. Placer dine reaktanter og enzym i en lille beholder med et låg, såsom et scintillationsflaske. Reaktionen vil begynde. Placer scintillationsflasken i et større bæger af stuetemperaturvand. Placer bægeret på en varmeplader. Placer et termometer inde i bægeret. Dette gør det muligt at måle reaktionstemperaturen på forskellige punkter.

Tag en 100 mikroliter prøve af reaktionen ved stuetemperatur, ca. 25 grader Celsius. Sæt varmepladen på. Ved forskellige temperaturer mellem 30 og 40 grader Celsius (30,5, 31, 31,5 osv.) Tager 100 mikroliter prøver af din reaktion.

Bestem koncentrationen af ​​dit produkt ved hver temperatur. Når temperaturen stiger over 40 grader Celsius, vil du se et fald i den hastighed, hvormed substratet omdannes til produkt, fordi enzymet er denatureret. Det punkt, hvor produktet produceres ved den maksimale hastighed, er det punkt, hvor temperaturen er optimalt.