Hvordan tilberedes fosfatbuffer pH 5,8?

For at fremstille *V* mL af en fosfatbuffer med *C"M af NaH2PO4 og *D*M af Na2HPO4, der producerer en pH-værdi på 5,8, skal du bruge følgende:

$$ [H^+] =10^{−5,8} =1,58 × 10^{−6} M$$

Hvor [H+] er den ønskede hydrogenionkoncentration.

Vi kan bruge Henderson-Hasselbalch-ligningen til at beregne forholdet mellem NaH2PO4 og Na2HPO4, der kræves for at opnå denne pH:

$$pH =pKa + log \venstre ( \frac{[A^-]}{[HA]} \right )$$

Hvor:

* *Ka* er syredissociationskonstanten for H2PO4- (den konjugerede syre af NaH2PO4)

* [A-] er koncentrationen af ​​Na2HPO4 (den konjugerede base af NaH2PO4)

* [HA] er koncentrationen af ​​NaH2PO4 (syreformen)

*Ka* for H2PO4- ved 25°C er *2,2 *10-7*. Derfor, ved at erstatte de givne værdier i Henderson-Hasselbalch-ligningen, får vi:

$$5,8 =7,2 + log \venstre ( \frac{[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} \right )$$

Ved at løse for [Na2HPO4] / [NaH2PO4], får vi:

$$\frac {[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} =0,398$$

Derfor bør forholdet mellem [NaH2PO4] og [Na2HPO4] være 1:0,398 for at opnå en pH på 5,8.

Trin 2:Forbered NaH2PO4- og Na2HPO4-opløsningerne

- Afvej den nødvendige mængde NaH2PO4 (0,2 M) og Na2HPO4 (0,1 M) ved hjælp af en analytisk vægt.

- Opløs hver forbindelse i Milli-Q-vand i separate beholdere.

- Fyld op på volumen af ​​hver opløsning til 500 ml med Milli-Q-vand.

*Trin 3:Bland NaH2PO4- og Na2HPO4-opløsningerne

- Bland de to opløsninger i det passende forhold (i dette tilfælde 1 volumen af ​​0,2 M NaH2PO4-opløsningen til 0,398 volumen af ​​0,1 M Na2HPO4-opløsningen).

- Tilsæt DI-vand for at bringe det samlede volumen op på 1 liter.

- Tjek bufferens pH ved hjælp af et pH-meter. Om nødvendigt justeres pH ved at tilsætte små mængder af enten 0,2 M NaH2PO4- eller 0,1 M Na2HPO4-opløsningen.