Hvordan kan du analysere farveløse stoffer ved hjælp af kromatografi?

1. Vælg den rigtige kromatografiteknik:

* Tyndlagskromatografi (TLC): Dette er en enkel og alsidig teknik. Det adskiller komponenter baseret på deres tilknytning til den stationære fase (normalt en silicagelplade) og den mobile fase (et opløsningsmiddel). Mens du ikke kan se farver, kan du visualisere de adskilte komponenter, der bruger:

* UV -lys: Mange stoffer absorberer UV -lys, hvilket gør dem synlige under en UV -lampe.

* visualiseringsreagenser: Specifikke kemiske reagenser kan reagere med de adskilte forbindelser for at producere farvede pletter.

* joddamp: Joddamp kan reagere med mange organiske forbindelser for at danne brune pletter.

* gaskromatografi (GC): Denne teknik adskiller flygtige stoffer baseret på deres kogepunkter. Det er typisk koblet med en detektor, der kan identificere og kvantificere komponenterne, såsom A:

* flammeioniseringsdetektor (FID): Dette er følsomt over for organiske forbindelser.

* massespektrometer (MS): Dette giver detaljerede strukturelle oplysninger om de adskilte forbindelser.

* High-performance væskekromatografi (HPLC): Denne kraftfulde teknik adskiller komponenter baseret på deres polaritet og interaktion med den stationære fase. Det bruges ofte til analyse af komplekse blandinger og er normalt koblet med en detektor som:

* UV/VIS -detektor: Detekterer forbindelser, der absorberer UV eller synligt lys.

* brydningsindeksdetektor: Detekterer ændringer i brydningsindekset for det eluerende opløsningsmiddel forårsaget af tilstedeværelsen af ​​en forbindelse.

2. Visualisering og identifikation:

* UV -lys: Mange forbindelser, endda farveløse, absorberer UV -lys. Ved hjælp af en UV -lampe kan du se pletterne med adskilte forbindelser på en TLC -plade.

* visualiseringsreagenser: Forskellige reagenser reagerer med specifikke funktionelle grupper i forbindelser for at skabe farvede pletter på en TLC -plade.

* detektorer: GC og HPLC bruger detektorer til at signalere tilstedeværelsen af ​​komponenter, når de elueres fra kolonnen.

3. Kvantitativ analyse:

* Kalibreringsstandarder: Ved at køre kendte mængder af dit stof sammen med din prøve kan du bruge kromatografiens resultater til at bestemme koncentrationen af ​​stoffet i prøven.

* Område under toppen: I GC og HPLC er området under toppen proportionalt med stoffets mængde.

Eksempel:

Forestil dig, at du vil analysere en blanding af sukker (glukose, fruktose og saccharose). Disse sukkerarter er farveløse, men du kan adskille dem ved hjælp af TLC eller HPLC.

* tlc: Efter at have kørt blandingen, kan du bruge et reagens som anilin-phthalat (som reagerer med sukker for at producere farvede pletter) til at visualisere de adskilte komponenter.

* HPLC: Ved hjælp af en UV/VIS -detektor kan du se toppe, der svarer til hvert sukker, når de elueres fra søjlen. Ved at sammenligne spidsområderne med kendte standarder kan du bestemme de relative mængder af hvert sukker i blandingen.

Husk at vælge den rigtige kromatografiteknik og visualiseringsmetode afhænger af det specifikke stof, du analyserer.