* Kobberioner interagerer med peptidbindinger: Kobbersulfat (cuso₄) dissocierer i opløsning til dannelse af kobberioner (Cu²⁺). Disse kobberioner har en stærk affinitet for nitrogenatomer i peptidbindinger, der forbinder aminosyrer sammen i proteiner.
* Kompleks dannelse: Når kobberioner interagerer med to eller flere peptidbindinger, danner de et kompleks med en karakteristisk lilla farve. Dette kompleks dannes på grund af koordinationsbindinger mellem kobberion og nitrogenatomer i peptidbindingerne.
* Farveintensitet: Intensiteten af den lilla farve er direkte proportional med koncentrationen af de tilstedeværende peptidbindinger. Dette gør det muligt at bruge Biuret -testen til kvantificering af proteinindholdet i en prøve.
Bemærk: Den lilla farve skyldes specifikt dannelsen af et koordinationskompleks mellem kobberionerne og peptidbindingerne. Dette kompleks har et tydeligt absorptionsspektrum, der får opløsningen til at virke lilla.
Hvorfor ikke andre farver?
* Andre reaktioner: Mens kobberioner kan interagere med andre komponenter i en proteinopløsning, er den lilla farve specifik for interaktionen med peptidbindinger. Reaktioner med andre komponenter kan føre til forskellige farveændringer, men Biuret -testen er specifikt afhængig af den lilla farve til peptiddetektion.
Kortfattet: Den lilla farve, der blev observeret, når kobbersulfat tilsættes til en proteinopløsning, er et resultat af dannelsen af et koordinationskompleks mellem kobberioner og peptidbindinger. Denne reaktion er grundlaget for Biuret -testen, en meget anvendt metode til påvisning af tilstedeværelsen af proteiner.