Mange biokemiske reaktioner er naturligt langsomme, medmindre de katalyseres af enzymer, som øger deres reaktionshastighed. Enzymkinetik måler enzymatisk reaktionshastighed for enkelt substrat under anvendelse af Michaelis-Menten ligningen, v = [S] Vmax /[S] Km. Michaelis-Menten-ligningen, opkaldt efter biokemist Leonor Michaelis og læge Maud Menten, beskriver forholdet mellem substratomdannelseshastigheden af et enzym (V) og substratets koncentration ([S]) ", ifølge Davidson College Kemi hjemmeside. Baseret på denne ligning kan Michaelis-Menten-kurven tegnes med x-aksen, der repræsenterer [S] i millimole og y-aksen repræsenterer V i sekunder /mikromole.
Forstå Michaelis-Menten Equation
Forstå formålet med hver værdi i ligningen og hvad den repræsenterer. V er omdannelseshastigheden eller reaktionshastigheden, [S] er substratkoncentrationen, Vmax er den maksimale konverteringshastighed, og Km (Michaelis konstant) er substratkoncentrationen, hvor konverteringshastigheden er halvdelen af Vmax.
Find værdierne for hver variabel i ligningen. [S] er den kendte koncentration for substratet, der analyseres, og ændring af denne værdi vil påvirke hastigheden af den enzymkatalyserede reaktion. Km- og Vmax-værdier er normalt angivet med substratet såvel i form af millimoler og sec-1, når de er angivet i et problem.
Løs den passende ligning for hver værdi, hvis værdierne ikke er angivet. Ifølge Mills College Biochemistry hjemmeside begynder du med steady state ligningen k1 [Efree] [S] = (k-1 + k2) [ES]. Definer Km ved at bruge ligningen Km-1 = k1 /(k-1 + k2). Løs for [ES] ved hjælp af ligningen [ES] = [S] [Et] /(Km + [S]) for at få [Ef] og [S]. Brug [Ef] til at definere Vmax ved hjælp af ligningen vmax = kcat [Et]. Konsulter en biokemi guide eller lærebog på højskoleniveau for detaljerede instruktioner om hvordan man løser hver af disse ligninger og for specifikke definitioner af hver variabel.
Indsæt Km, [S] og Vmax i Michaelis-Menten ligningen og løse for V, hastigheden eller reaktionshastigheden.
Plotting af Michaelis-Menten-kurven
Brug grafpapir til at tegne en x- og y-akse. Mærk x-aksen mM af [S] eller koncentration af substrat. Label y-sek /mikromole V eller reaktionshastighed.
Indsæt forskellige værdier af [S] i Michaelis-Menten ligningen sammen med værdierne fundet for Km og Vmax for at løse V.
Plot værdierne for [S] på x-aksen og de tilsvarende løste værdier for V på y-aksen. Grafen skal ligne en rektangulær hyperbola, hvor højere koncentrationer af substrat svarer til hurtigere enzymatiske reaktioner.