Chip-baseret digital PCR-detektionsteknologi og instrument udviklet

Et fælles hold fra Kina leverede for nylig en følsom, multipleksing, kvantitativ detektionsmetode til tidlig diagnose og målrettet terapi af myeloproliferative neoplasmer, en type kronisk hæmatologisk tumor, der er ledsaget af knoglemarvssvigt eller leukæmi.

Holdet, ledet af Zhou Lianqun fra Suzhou Institute of Biomedical Engineering and Technology ved det kinesiske videnskabsakademi og GUAN Ming fra Huashan Hospital, etableret en nanopartikel-assisteret digital loop-medieret isotermisk amplifikation (nano-dLAMP) platform til analyse af myeloproliferative neoplasmer.

Digital polymerase kædereaktion (digital PCR, dPCR), høj følsomhed, absolut kvantitativ og højtolerance nukleinsyredetektionsteknologi, spiller en vigtig rolle inden for en række anvendelsesområder, såsom påvisning af sjældne mutationer, kopi nummer variation, flydende biopsi, enkeltcelleanalyse, genetisk modificeret påvisning, viral load test, og mikrobiologisk kvantitativ analyse.

I dette studie, forskerne fremstillede mikroarray-chips med fire fysiske partitioner til samtidig påvisning af calreticulin type 1, calreticulin type 2, janus kinase 2 V617F mutationer og et internt referencegen.

Derefter brugte de PCR-additiver og nanopartikler til at gøre den traditionelle loop-medierede isotermiske amplifikation (LAMP) egnet til amplifikation i nanoliterskala.

Resultater antydede, at nanopartikler kunne forbedre amplifikationsydelsen af ​​nanoliter LAMP.

Kvantitativ påvisning af de vigtigste myeloproliferative neoplasma molekylære markører kunne udføres samtidigt i en fire-partition microarray chip inden for en time. Aftalen mellem den udviklede platform og det kommercielle Quantstudio 3D var høj på 99%.

Denne nøjagtige, hurtig, multipleks, og billig nano-dLAMP platform kunne være et lovende værktøj til klinisk diagnose i fremtiden, ifølge forskerne.

Resultaterne af undersøgelsen blev offentliggjort i Sensors &Actuators B:Chemical med titlen "Establishment of Scalable Nanoliter Digital LAMP Technology for the Quantitative Detection of Multiple Myeloproliferative neoplasm molecular markors."

Zhou's gruppe har fokuseret på biosensorfelt i mere end 10 år, og har akkumuleret et solidt fundament i udvikling af biosensormetoder, biochip design og forarbejdning, og udvikling af biovidenskabelige instrumenter.

I den digitale PCR-forskning og -udvikling, chip-baseret dPCR (cdPCR) metode med høj isolationsstabilitet, god temperaturensartethed og hurtig detektionshastighed blev udviklet. Der blev opnået en række fremskridt med påvisningsmetoden, chip, reagens og instrument til cdPCR.