I en første demonstration af "elektronvideografi" har forskere fanget et mikroskopisk bevægende billede af den delikate dans mellem proteiner og lipider, der findes i cellemembraner. Teknikken kan bruges til at studere dynamikken i andre biomolekyler og bryde fri af begrænsninger, der har begrænset mikroskopi til stillbilleder af fikserede molekyler, siger forskere og samarbejdspartnere fra University of Illinois Urbana-Champaign ved Georgia Institute of Technology.
"Vi går ud over at tage enkelte snapshots, som giver struktur, men ikke dynamik, til løbende at registrere molekylerne i vand, deres oprindelige tilstand," sagde studieleder Qian Chen, en Illinois-professor i materialevidenskab og teknik. "Vi kan virkelig se, hvordan proteiner ændrer deres konfiguration, og i dette tilfælde, hvordan hele protein-lipid-selv-samlede struktur svinger over tid."
Forskerne rapporterede deres teknik og resultater i tidsskriftet Science Advances .
Elektronmikroskopiteknikker billede på molekylær eller atomær skala, hvilket giver detaljerede billeder i nanometerskala. Men de er ofte afhængige af prøver, der er blevet frosset eller fikseret på plads, hvilket efterlader videnskabsmænd til at prøve at udlede, hvordan molekyler bevæger sig og interagerer – som at forsøge at kortlægge koreografien af en dansesekvens fra en enkelt frame af filmen.
"Det er første gang, vi ser på et protein i individuel skala og ikke har frosset det eller mærket det," sagde professor i Georgia Tech Aditi Das, en tilsvarende forfatter til undersøgelsen. "Normalt er vi nødt til at krystallisere eller fryse et protein, hvilket giver udfordringer med at optage billeder i høj opløsning af fleksible proteiner. Alternativt bruger nogle teknikker et molekylært tag, som vi sporer, frem for at se selve proteinet. I denne undersøgelse ser vi proteinet, som det er, opfører sig, som det gør i et flydende miljø, og ser, hvordan lipider og proteiner interagerer med hinanden."
Forskerne opnåede videografi ved at kombinere en ny vandbaseret transmissionselektronmikroskopimetode med detaljeret beregningsmodellering på atomniveau. Den vandbaserede teknik involverer indkapsling af dråber i nanometerskala i grafen, så de kan modstå det vakuum, som mikroskopet fungerer i. Sammenligning af de resulterende videodata med molekylære modeller, som viser, hvordan tingene bør bevæge sig baseret på fysikkens love, hjælper forskerne ikke kun med at fortolke, men også validere deres eksperimentelle data.
"I øjeblikket er dette virkelig den eneste eksperimentelle måde at filme denne form for bevægelse over tid," sagde John W. Smith, den første forfatter af papiret, som fuldførte arbejdet, mens han var kandidatstuderende ved Illinois. "Livet er i væske, og det er i bevægelse. Vi forsøger at komme til de fineste detaljer i den forbindelse på en eksperimentel måde."
Til det nye studie - den første publicerede demonstration af elektronvideografiteknikken - undersøgte forskerne nanoskalaskiver af lipidmembraner, og hvordan de interagerer med proteiner, der normalt findes på overfladen af eller indlejret i cellemembraner.
"Membranproteiner er i grænsefladen mellem celler og mellem indersiden og ydersiden af cellen, og styrer, hvad der går ind og ud," sagde Smith. "De er overvældende mål for medicin; de er involveret i alle slags processer som hvordan vores muskler trækker sig sammen, hvordan vores hjerner fungerer, immungenkendelse; og de holder celler og væv sammen. Og al kompleksiteten af hvordan et membranprotein virker kommer fra ikke kun sin egen struktur, men også hvordan den oplever lipiderne omkring sig."
Elektronvideografi gjorde det muligt for forskerne ikke kun at se, hvordan hele lipid-proteinsamlingen bevægede sig, men også dynamikken i hver komponent. Forskerne fandt ud af, at der var forskellige regioner inden for nanoskiven, og både mere udsving og mere stabilitet end forventet.
Mens det ofte antages, at indflydelsen af et membranproteins bevægelse er begrænset til de lipidmolekyler, der direkte omgiver det, så forskerne mere dramatiske udsving over et større område, sagde Smith. Udsvingene fik en fingerlignende form, som slim sprøjtet på en væg. Alligevel ville nanodisken, selv efter en sådan dramatisk bevægelse, vende tilbage til sin normale konfiguration.
"Det faktum, at vi så disse domæner, og vi så det komme sig fra disse processer, tyder på, at interaktioner mellem proteinet og membranen faktisk har en større rækkevidde, end man normalt tror," sagde Smith.
Forskerne planlægger at bruge deres elektronvideografiteknik til at studere andre typer membranproteiner og andre klasser af molekyler og nanomaterialer.
"Vi kunne studere ionkanaler, der åbner og lukker for at regulere flow og celle-til-celle interaktioner ved hjælp af denne platform," sagde Chen.
Qian Chen er også tilknyttet afdelingen for kemi, Beckman Institute for Advanced Science and Technology, Carle Illinois College of Medicine og Materials Research Laboratory i Illinois.
Flere oplysninger: John W. Smith et al., Electron videography of a lipid-protein tango, Science Advances (2024). DOI:10.1126/sciadv.adk0217
Journaloplysninger: Videnskabelige fremskridt
Leveret af University of Illinois at Urbana-Champaign
Sidste artikelNanopartikler af risklid viser lovende som et overkommeligt og målrettet anticancermiddel
Næste artikelMagnetisk med en knivspids brint:Forskerhold udvikler ny idé til at forbedre egenskaberne af ultratynde materialer