Hvorfor nogle gange er vi os blå og røde med belysningssystemet i et optisk mikroskop?

Her er sammenbruddet:

1. Belysning:

* hvidt lys er den primære belysningskilde i de fleste optiske mikroskoper, inklusive fluorescensmikroskoper. Det belyser den prøve, der ses.

2. Fluorescens:

* I fluorescensmikroskopi , specifikke farvestoffer (kaldet fluoroforer) bruges til at mærke prøven. Disse farvestoffer udsender lys af en bestemt farve, når de er ophidset af lys af en anden farve.

* blå lys bruges ofte til at begejstre grønne fluorescerende proteiner (GFP) , som ofte bruges som genetiske markører.

* rødt lys bruges ofte til at begejstre røde fluorescerende proteiner (RFP) eller andre farvestoffer, der udsender rød fluorescens.

3. Filtre:

* Mikroskopet bruger filtre til at adskille excitationslyset fra den udsendte fluorescens.

* excitationsfilter: Dette filter tillader kun den specifikke bølgelængde af lys, der begejstrer fluoroforen til at passere igennem.

* Emissionsfilter: Dette filter tillader kun den specifikke bølgelængde af lys, der udsendes af fluoroforen, at nå observatøren.

Sådan fungerer det:

1. excitation: Blåt lys er rettet mod prøven, der spænder GFP -molekylerne i prøven.

2. Emission: De ophidsede GFP -molekyler udsender grønt lys.

3. Filtrering: Den røde excitationslys blokeres af et emissionsfilter, der kun giver den grønne fluorescens mulighed for at nå observatørens øje eller kameraet.

Hvorfor bruge blå og rød?

* forskellige farver: Blåt og rødt lys vælges for deres forskellige bølgelængder, hvilket giver dem mulighed for at begejstre og detektere forskellige fluoroforer. Dette muliggør visualisering af flere mål inden for en enkelt prøve.

* spektral adskillelse: Blåt og rødt lys er relativt langt fra hinanden på det elektromagnetiske spektrum, hvilket gør det lettere at filtrere uønskede bølgelængder og isolere den specifikke fluorescens.

Kortfattet:

* Blåt og rødt lys bruges i fluorescensmikroskopi til at begejstre forskellige fluoroforer, men ikke som den primære belysningskilde.

* Filtre er vigtige for at adskille excitationslyset fra den udsendte fluorescens, hvilket muliggør visualisering af specifikke mål inden for en prøve.