Protein Overekspressionsprotokol

En proteinoverekspressionsprotokol henviser til en hvilken som helst metode til at få en organisme til at fremstille et ønsket protein i tilstrækkelig mængde til yderligere undersøgelse. Forskere bruger ofte bakterier og gær til at gøre deres specifikke protein af interesse, men i teorien kan enhver organisme arbejde.

Betydning

For at studere strukturen eller funktionen af ​​et bestemt protein har du brug for at have en betydelig mængde til rådighed for dine ønskede test. Nogle proteiner forekommer naturligt i store mængder og renses let fra deres værtsorganisme. De fleste proteiner forekommer dog i meget små mængder eller forekommer i organismer, hvorfra proteiner ikke let kan oprenses. Proteinoverekspressionsprotokoller genererer store mængder af ønskede proteiner til videre undersøgelse, hvilket tillader forskere at studere lavmængde, sjældne, toksiske og jævnt muterede proteiner.

Proteinudtryk

Almindelige organismer, der anvendes i overekspressionsprotokoller, omfatter bakterier eller gær. Forskere konstruerer disse organismer for at bære et gen der koder for et ønsket protein. De placerer genet under specifik kontrol, så organismen ikke udtrykker eller fremstiller det ønskede protein, indtil det specifikt er induceret til at gøre det. For eksempel kan forskere manipulere en organisme til at bære et gen under direkte kontrol af et bestemt sukker. I mangel af det specifikke sukker vokser organismen, men kan ikke gøre proteinet. I tilstedeværelsen af ​​sukker vil organismen gøre meget af proteinet.

Overvejelser

Mange forskellige overekspressionsprotokoller virker, men skal optimeres til et bestemt protein og en organisme. Optimering kræver normalt forsøg og fejl og afhænger ofte af proteinets struktur og funktion. Overekspression af nogle proteiner kan dræbe organismen, der gør proteinet. I dette tilfælde kan du blive nødt til at vente, indtil organismens population vokser tilstrækkeligt stort, før der frembringes proteinproduktion. Ændring af organismer eller skiftende typer af samme organisme kan også hjælpe.