Metoden involverer at placere en standardiseret papirskive imprægneret med en specifik koncentration af det antimikrobielle middel på overfladen af en agarplade, der er podet med testbakteriestammen. Pladerne inkuberes derefter for at tillade bakterievækst og diffusion af det antimikrobielle middel fra skiven ind i agaren.
Efter inkubation undersøges pladerne for tilstedeværelsen af en klar hæmningszone omkring skiven. Hæmningszonen repræsenterer det område, hvor bakterievækst er blevet forhindret på grund af midlets antimikrobielle aktivitet. Diameteren af inhiberingszonen måles og sammenlignes med standardreferencetabeller for at bestemme bakteriestammens modtagelighed eller resistens over for det antimikrobielle middel.
Diskdiffusionsmetoden giver en kvalitativ eller semikvantitativ vurdering af antimikrobiel modtagelighed. Det kan bruges til at screene for effektiviteten af forskellige antimikrobielle midler mod en bestemt bakteriestamme, til at sammenligne forskellige bakteriestammers modtagelighed for det samme antimikrobielle middel og til at overvåge udviklingen af antimikrobiel resistens.
Denne metode er almindeligt anvendt i kliniske laboratorier, forskningsmiljøer og farmaceutiske industrier til at evaluere effektiviteten af antimikrobielle midler og vejlede passende antibiotikabehandling i klinisk praksis.