Hvorfor måles det samlede protein ved 595 nm i Bio-Rad-assay?

* Coomassie Brilliant Blue G-250 Dye: Assayet bruger dette farvestof, der binder til proteiner. Denne binding ændrer farvestoffens struktur og forårsager et skift i dets absorbansspektrum.

* farveændring: Når farvestoffet binder til protein, ændrer det farve fra brun til blå. Denne blå form har en maksimal absorbans ved 595 nm.

* Kvantificering af protein: Intensiteten af ​​den blå farve er direkte proportional med mængden af ​​protein, der er til stede. Ved at måle absorbansen ved 595 nm kan vi kvantificere proteinkoncentrationen.

Kortfattet:

* Bio-Rad-assayet bruger Coomassie strålende blå G-250 farvestof til at binde til proteiner.

* Det bundne farvestof bliver blåt og absorberer maksimalt ved 595 nm.

* Absorbans ved 595 nm måles for at bestemme koncentrationen af ​​protein.

Selvom absorbansen måles ved 595 nm, er det ikke det samlede protein, der måles direkte, men farveændringen forårsaget af farvestofbindingen til proteiner.