Hvad er den rigtige rækkefølge for standardforberedelse af en histologisk prøve?

1. Fiksering:

* Dette er det første og mest kritiske trin.

* Målet er at bevare vævsstrukturen og forhindre nedbrydning.

* Almindelige fixativer inkluderer formalin, glutaraldehyd og alkohol.

2. Dehydrering:

* Vand fjernes fra vævet ved hjælp af en graderet række alkoholopløsninger (normalt 70%, 90%, 95%og 100%).

* Dette forbereder vævet til indlejring i paraffinvoks.

3. Clearing:

* Alkohol fjernes fra vævet og erstattes med et opløsningsmiddel, der er blandbart med både alkohol og paraffinvoks (f.eks. Xylen, toluen eller histoclear).

4. Indlejring:

* Vævet infiltreres med smeltet paraffinvoks under vakuum.

* Denne proces gør det muligt for voks at gennemsyre vævet og størkne, hvilket skaber en fast blok, der kan sektiones.

5. Sektion:

* Paraffinblokken trimmes og skives i tynde sektioner (typisk 4-10 mikrometer tyk) ved anvendelse af et mikrotom.

6. Montering:

* Sektionerne er omhyggeligt monteret på glasglas, normalt med et vandopløseligt klæbemiddel.

7. Deparaffinisering:

* Paraffinvoks fjernes fra vævssektionerne ved anvendelse af en række opløsningsmidler (f.eks. Xylen, toluen).

8. Rehydrering:

* Vævsektionerne rehydreres gennem en graderet række alkoholopløsninger (f.eks. 100%, 95%, 90%, 70%og vand).

9. Farvning:

* Det er her vævskomponenterne visualiseres.

* Der er adskillige pletter, hver med sine egne egenskaber og applikationer.

* Eksempler inkluderer hæmatoxylin og eosin (H&E) til generel morfologi og specielle pletter til specifikke celletyper eller strukturer.

10. Montering:

* De farvede sektioner er monteret med et dækglas og et monteringsmedium (f.eks. DPX, permount).

11. Mærkning:

* Slassene er mærket med relevant information (patientnavn, dato, vævstype, plet).

Bemærk: Dette er en standardprotokol. Der kan være variationer afhængigt af den specifikke vævstype, farvningsteknikker og forskningsapplikationer.