Her er en sammenbrud:
Gram-positive bakterier:
* tyk peptidoglycan lag: De har et tykt lag peptidoglycan, en kompleks polymer, der danner en stiv mesh-lignende struktur, der omgiver cellemembranen. Dette lag tegner sig for ca. 90% af cellevæggenes sammensætning.
* teichoinsyrer: De har også teichoinsyrer indlejret i deres peptidoglycan -lag. Disse syrer er negativt ladet og bidrager til den strukturelle integritet af cellevæggen.
Gram-negative bakterier:
* tynd peptidoglycan lag: De har et meget tyndere peptidoglycan-lag sammenlignet med gram-positive bakterier. Dette lag tegner sig kun for ca. 10% af cellevæggenes sammensætning.
* ydre membran: De har en yderligere ydre membran, der omgiver det tynde peptidoglycan -lag. Denne ydre membran indeholder lipopolysaccharid (LPS), der fungerer som et endotoksin og bidrager til bakteriens patogenicitet.
* Periplasmisk rum: Mellem den indre cellemembran og den ydre membran er der et periplasmisk rum, der indeholder enzymer og andre proteiner.
Gramfarvningsproceduren:
Gramfarvningsproceduren anvender en række farvestoffer og reagenser til at skelne mellem disse to cellevægstyper.
1. krystalviolet (primær plet): Både gram-positive og gram-negative bakterier er farvet lilla af krystalviolet.
2. jod (mordant): Jod danner et kompleks med krystalviolet, hvilket gør det vanskeligere at fjerne.
3. alkohol (Decolorizer): Dette trin er afgørende. Alkoholen dehydraterer peptidoglycan-laget og krymper porerne i gram-positive bakterier. Dette fangede krystalviolet-iodekompleks forbliver i det tykke peptidoglycanlag, hvilket holder bakterierne lilla. I gramnegative bakterier opløses alkoholen imidlertid den ydre membran og det tynde peptidoglycan-lag, hvilket tillader krystalviolet-iod-komplekset at udvaskes.
4. safranin (Counterstain): De affarvede gram-negative bakterier tager derefter den røde safranin-plet, der vises lyserød eller rød under mikroskopet.
Kortfattet:
Forskellen i cellevægsstruktur, især tykkelsen af peptidoglycan -laget, dikterer gramfarvningsresultatet. Gram-positive bakterier bevarer krystalviolet-pletten på grund af deres tykke peptidoglycan-lag, mens gramnegative bakterier mister pletten og ser ud til at være lyserød eller rød efter forsænkning. Denne farvningsforskel er et værdifuldt værktøj til bakteriel identifikation og klassificering.