Hvilke mikroorganismer trives med næringsagar:En praktisk guide

Af Joan Reinbold • Opdateret 30. august 2022

Næringsagar er et alsidigt medium til almen brug, der understøtter væksten af et bredt spektrum af ikke-kræsne bakterier, gær og skimmelsvampe. Dens sammensætning leverer en afbalanceret forsyning af organisk nitrogen, kulstof, vitaminer og mineraler, hvilket gør den til arbejdshesten i mange mikrobiologiske laboratorier.

Mikroorganismer, der trives med næringsagar

Fordi næringsagar ikke indeholder særlige vækstfaktorer, er den ideel til dyrkning af organismer, der ikke kræver specifikke substrater. Typiske kolonier omfatter Streptococcus , Stafylokokker , Escherichia coli og en række miljømæssige isolater. Kræsne organismer såsom Treponema pallidum (syfilis-agenset) forbliver udyrkelige på dette medium på grund af deres unikke ernæringsmæssige krav.

Forskere bruger næringsagar til rutinemæssig isolering, kolonitælling og foreløbig identifikation. Det tjener også til miljøovervågning - testning af vand, spildevand, skaldyr, kød og mejeriprodukter for forurening.

Nøgleingredienser i næringsagar

Standardformuleringen er:

• 0,5 % pepton (proteinhydrolysat)
• 0,3 % oksekødekstrakt (eller gærekstrakt)
• 1,5 % agar
• 0,5 % natriumchlorid

Disse proportioner kan variere lidt fra producent til producent, men den overordnede næringsstofprofil forbliver konsistent.

Forstå agar-, pepton- og oksekødsekstrakt

Agar

Agar er et komplekst polysaccharid afledt af marine rødalger. Det størkner mediet ved 113°F (45°C) og smelter ved 203°F (95°C). Selvom det giver strukturel støtte, tilbyder agar ingen næringsværdi for mikrober.

Peptone

Pepton er en opløselig proteinfraktion fremstillet ved delvis hydrolyse af animalske eller planteproteiner. Det leverer organisk nitrogen, nogle aminosyrer og mindre vitaminer, hvilket fremmer robust mikrobiel vækst.

Oksekødekstrakt

Oksekødekstrakt er en vandopløselig blanding af aminosyrer, peptider, nukleotider, vitaminer og mineraler, der stammer fra kogt oksekødsvæv. Det øger væksten af ​​en bred vifte af bakterier. Gærekstrakt er en acceptabel erstatning, der tilbyder lignende næringsstoffer.

Forberedelse af næringsagar

1. Væg 28 g næringsagarpulver og opløs i 1L destilleret vand.
2. Opvarm til rullende kog under omrøring for at sikre fuldstændig opløsning (≈1 min).
3. Autoklaver ved 121°C (250°F) i 15 min.
4. Afkøl til ~45°C (110°F) før påfyldning.
5. Doser i sterile petriskåle eller -rør; dæk og lad størkne.
6. Opbevar pladerne på hovedet i et mørkt, nedkølet miljø for at forhindre kondens.

Den endelige pH-værdi skal være 6,8, hvilket giver et lys ravgult, fast gelatinøst medium. Når pladerne opbevares ved 4°C, forbliver de levedygtige i op til to år, undtagen synlig forurening.

Opbevaring og holdbarhed

Opbevar tallerkenerne på køl, tildækket og på hovedet. Undgå at udsætte dem for lys eller temperaturudsving. Undersøg for farveændringer, uklarhed eller mikrobiel kontaminering før brug.

At følge disse retningslinjer sikrer pålidelig dyrkning af ikke-kræsne organismer og nøjagtige mikrobiologiske vurderinger.