Hvordan er et spektrofotometer kalibreret?

spektrofotometer kalibrering:en trin-for-trin-guide

Spektrofotometre er vigtige værktøjer til måling af absorbans og transmission af lys gennem en prøve, hvilket giver værdifuld information inden for områder som kemi, biologi og medicin. Præcis kalibrering er afgørende for at sikre pålidelige og præcise målinger. Her er en sammenbrud af processen:

1. Bølgelængdekalibrering:

* ved hjælp af en standard: Dette er den mest almindelige metode. En kendt standard med en specifik absorptionstop ved en kendt bølgelængde (f.eks. Holmiumoxidfilter, didymiumfilter) anvendes.

* Procedure:

* Standarden er placeret i spektrofotometerets bjælkesti.

* Instrumentets bølgelængde justeres, indtil den maksimale absorbans er registreret.

* Instrumentet kalibreres derefter til den kendte bølgelængde af standardens top.

* Betydning: Sikrer, at instrumentet nøjagtigt identificerer bølgelængderne af lys, det bruger til måling.

2. Absorbans/transmissionskalibrering:

* ved hjælp af et tomt: Et tomt er en løsning, der indeholder alle komponenterne i prøven undtagen den analyt, der måles.

* Procedure:

* Blanken er placeret i spektrofotometerets bjælkesti.

* Instrumentet er indstillet til at læse 100% transmission eller 0 absorbans (afhængigt af instrumentet).

* Dette indstiller basislinjen for alle efterfølgende målinger.

* Betydning: Dette kalibreringstrin korrigerer for enhver absorbans eller transmission forårsaget af opløsningsmidlet eller andre komponenter i prøven, der ikke er analyt af interesse.

3. Instrumentspecifik kalibrering:

* Kalibreringsstandarder: Nogle spektrofotometre kræver specifikke kalibreringsstandarder (f.eks. Opløsninger med kendte koncentrationer af specifikke analyser).

* Procedure:

* Mål absorbansen eller transmissionen af ​​standarderne ved hjælp af spektrofotometeret.

* Indtast disse målinger i instrumentets software.

* Instrumentet skaber derefter en kalibreringskurve, der vedrører absorbans eller transmission til koncentration.

* Betydning: Gør det muligt for instrumentet at direkte konvertere absorbans- eller transmissionsaflæsninger til koncentrationsmålinger for specifikke analyser.

Yderligere tip:

* Regelmæssig kalibrering: Hyppig kalibrering (dagligt eller ugentligt) er afgørende for at opretholde nøjagtighed.

* Korrekt vedligeholdelse: At holde instrumentet rent og fri for støv, fingeraftryk og ridser er afgørende for optimal ydeevne.

* Brug af standarder og reagenser af høj kvalitet: Kalibreringens nøjagtighed afhænger af kvaliteten af ​​de anvendte standarder og reagenser.

* Temperaturkontrol: Nogle spektrofotometre kræver et stabilt temperaturmiljø for nøjagtige målinger.

Bemærk: De specifikke kalibreringsprocedurer og -frekvens kan variere afhængigt af spektrofotometermodellen og dens tilsigtede anvendelse. Konsulter altid instrumentets manual for detaljerede instruktioner.