Metoder til afgassning af buffere

Uanset om du skal nedbryde eller deaerere, vil din bufferopløsning afhænge af dens anvendelse. Hvis tilstedeværelsen af ​​overskydende ilt i bufferen vil påvirke den kemiske reaktion, du leder efter, eller hvis dannelsen af ​​luftbobler i opløsningen vil påvirke aflæsninger eller flow, skal du nedbryde din buffer. Denne artikel forudsætter, at du allerede har forberedt din buffer og filtreret det om nødvendigt.

Vacuum

Afgasning ved vakuum er den mest almindelige måde at fjerne luft fra en bufferopløsning på. Placer din løsning i en sidearmkolbe med en omrøringsstang og brug en gummiprop til at forsegle toppen. Anbring kolben på en omrøringsplade og drej pladen på, så omrøringsstangen spinder med en mellemhastighed. Dette hjælper med at flytte luft ud af løsningen. Tilslut slangen til vakuumsystemet til kolbeens sidearme og tænd vakuumet med lav hastighed. Lad opløsningen nedbrydes i mindst en time.

Vakuum med sonikering

Brug samme opsætning med sidearmkolben og vakuum, du kan udelade omrøringspladen og røre baren og placere kolben i en sonicator. Sonicatoren bruger lydbølger, der frigør mere luft fra din løsning end rørstangen.

Helium Sparging

Helium sparging - også kaldet heliumbobling eller inertgasrensning - er en af De mest effektive måder at afgrænse din buffer på, hvis du har en heliumlinie i dit laboratorium. Placer en sprængfrit - et stik, der har et stenlignende filter i slutningen - på enden af ​​din heliumlinie, og placér linjen og frit i din løsning. Tænd heliumet ved et meget lavt tryk i ca. fem minutter for at tillade helium at fjerne oxygenet. Dette må muligvis gentages dagligt.

Inline Degassers

Nogle kromatografisystemer vil have en inline-opløsningsgasafbryder. Systemet fjerner gassen fra din buffer, inden den sendes gennem kromatografikolonnen. Du behøver ikke at afgravere din løsning på forhånd. Men hvis du oplever baseline støj på dig chromatogram, bør du overveje afgassning ved hjælp af en af ​​de ovennævnte metoder ud over at bruge inline gasser.