Hvordan er en prøve forberedt til visning under et mikroskop?

Et tidligere usynligt rige blev afsløret i begyndelsen af ​​1600'erne med opførelsen af ​​de første sammensatte mikroskoper ført til større revisioner inden for videnskabelig forståelse. Grundlæggende sammensatte mikroskoper er nu standardudstyr inden for medicin og naturvidenskab. Overført synligt lys skinner gennem tynde præparater til forstørrelse. Transmissions- og scanningselektronmikroskoper udviklet fra 1931 og fremefter. De bruger ikke optisk lys, men bjælker af elektroner og magnetfelter for at få vist prøver. For størstedelens vedkommende for institutionel forskning kræver præparatberedskab komplekse og dyre udstyr.

Forståelse af sammensatte mikroskoper

Der findes flere specialiserede typer af sammensatte mikroskoper, men lyse feltmikroskoper er mest almindelige. Prøver til dem bør kun være flere mikron, hvilket er en milliontedel meter, tykt. Tykkere prøver må ikke lade nok lyse igennem og tillader ikke præcis fokusering. Lette feltmikroskoper har et rør med objektivlinser i bunden, tættest på prøven og en okulær linse eller okular på toppen. Flere objektiv linser med forskellige forstørrelser drejer sig om en næse eller tårn. Scenen lige under næsestykket holder prøven glide, og nedenunder skinner en kilde af lys op gennem en kondensator til prøven. Moderne sammensatte mikroskoper kan forstørre en genstand fra 1.000 til 2.000 gange dens oprindelige dimensioner.

Hele mounts

For små ting som hår, små insekter, insektdele eller pollenkorn er prøven placeret direkte på midten af ​​et glas- eller plastmikroskop dias med en lille mængde monteringsmedium, normalt et syntetisk eller naturligt harpiksprodukt til permanente dias. For midlertidige dias, såsom en dråbe vand med vand, der indeholder mikroorganismer, er vandet monteringsmediet. Beskyt prøver med et dækslip, et rundt eller firkantet meget tyndt stykke glas eller plast. Nogle prøver har brug for farvning med naturlige eller syntetiske farvestoffer, der er beregnet til mikroskopi at blive set godt.

Squashes and Smears

En simpel måde at forberede en tynd prøve på er at squash eller flade et lille stykke væv under dækslet. Hurtigt voksende væv, såsom rodtip eller stifter, der undergår celledeling, bruges ofte i planteprøver til at se kromosomer, bevares i fikserende, derefter blødgøres og farves for at afsløre kromosomerne. Et mildt tryk fra viskelæderenden af ​​en blyant centreret over dækslipet prøve tvinger cellerne fra hinanden i et enkelt lag. I udtværinger spredes prøven tyndt på tværs af et lysbillede ved hjælp af et andet objektglas som sprederen, og det resulterende smear tørres og farves. I medicin smøres prøver af kropsvæsker, såsom blod, cerebro-spinalvæske eller sæd.

Farvede vævssektioner

En mere kompliceret snitning finder sted, når strukturen og organisationen af ​​en helhed lille organisme eller et vævstykke skal studere. For de fleste prøver bliver vævet først bevaret og hærdet, og vandet fjernes. Så er prøven indlejret i et stift medium som voks eller plast og skåret i meget tynde sektioner kun adskillige mikrometer tyk ved hjælp af en præcisionsmaskine kaldet et mikrotom. Prøven er orienteret for at give tværsnit eller langsgående sektioner, når skåret. Afsnittene er klæbet på mikroskop dias, indlejringsmediet fjernet, og vævene farves for at differentiere strukturer og celler. Hvor hastighed er afgørende, såsom i kirurgiske biopsier for kræft, bliver prøver frosne, skåret med et frysende mikrotom, farvet og undersøgt.