Escherichia coli, E. coli, er en bakterie, der vokser i tyndtarmens nedre tarm. Denne bakterie blev først opdaget i slutningen af 1800'erne. Siden da har den haft en lang brugstid i videnskabelig forskning. Det er den mest anvendte organisme inden for molekylær genetik. En del af grunden til, at E. coli er almindeligt anvendt i videnskabelig forskning er, at det er let at dyrke i et laboratorium. De faktorer, der gør E. coli nemme at vokse, er dets enkle ernæringsbehov, hurtig vækst og moderat vedligeholdelseskrav.
Steriliser inokuleringssløjfen ved at placere den i Bunsen-brænderens flamme. Pass den nedre halvdel af sløjfen gennem flammen, indtil den lyser rødt.
Tillad, at sløjfen afkøles. Du kan røre den til den sterile agar på pladen for at sikre, at den er afkølet. Placer ikke løkken på bordet eller lad det komme i kontakt med andet end sterilt agar eller den ønskede kultur nu, da den er blevet steriliseret.
Dyk søjlen ind i E. coli-kulturen og fjern den derefter.
Åbn agarpladen og forsigtigt glide sløjfen frem og tilbage over overfladen af en del af agar. Pas på ikke at ridse gennem agar med løkken. Agaren giver de næringsstoffer, som E. coli skal vokse.
Sæt løkken i Bunsen-brænderen igen for at sterilisere den. Når sløjfestangen er afkølet, skal du røre den på en steril del af pladen for at sikre, at den er kølig og derefter glide sløjfen gennem dit første strejf for at gøre et andet strejf. Denne anden strimmel er en fortyndet version af det første strejf. Gentag denne steriliserings- og glideproces, indtil flere dele af agarpladen er glidet over. Grunden til at du gør dette er, at du senere kan vælge fra enkle klonale kolonier. Dette vil hjælpe med at sikre, at du har mindst et afsnit, der har individuelle kolonier - ikke for koncentreret (som vil have for meget vækst og ikke tillade dig at vælge fra en enkelt koloni) og ikke for fortyndet (som ikke ville give kolonier) .
Steriliser sløjfen i flammen en sidste gang, før du sætter den til side i arbejdsområdet.
Sæt toppen tilbage på agarpladen. Drej tallerkenen på hovedet og læg den ind i inkubatorindstillingen til 37 grader Celsius (98,6 grader Fahrenheit). Denne ideelle inkubationstemperatur simulerer temperaturen på den menneskelige krop, hvor E. coli befinder sig. Inden for 24 til 48 timer vises synlige kolonier af E. coli-bakterier i agarpladen.
Advarsel
Korrekt indeslutning af E. coli-prøverne og sterilisering af inokulationssløjfen reducerer chance for at sprede bakterierne. Der må ikke indtages mad eller drikke i forsøgsområdet. Brug af handsker vil yderligere reducere risikoen for håndforurening.
Sidste artikelKalk- og eddikvidenskabsprojekter
Næste artikelHvordan man ekstraherer olie fra Flowers