Hvad er funktionen af ​​natriumacetat i dna-isolering?

1. Fældning af nukleinsyrer: Natriumacetat hjælper, når det tilsættes til en DNA-opløsning under kontrollerede temperatur- og pH-forhold, med udfældningen af ​​nukleinsyrer (både DNA og RNA) fra opløsningen. Det reducerer opløseligheden af ​​DNA ved at neutralisere de negative ladninger, der er til stede på fosfatrygraden i DNA-molekylet. Dette gør det muligt for DNA'et at danne uopløselige salte, som let kan adskilles fra cellelysatets andre komponenter.

2. Fjernelse af forurenende stoffer: Natriumacetat hjælper med at fjerne forurenende stoffer, såsom proteiner, celleaffald og andre urenheder, under DNA-isolering. Når natriumacetat tilsættes, forbliver disse kontaminanter i opløsning, mens det udfældede DNA kan opsamles ved centrifugering.

3. pH-kontrol: Natriumacetat fungerer som en buffer for at opretholde den passende pH under DNA-isolering. Den optimale pH for DNA-udfældning er normalt mellem 5,0 og 5,2. Natriumacetat hjælper med at opretholde dette pH-område, som er afgørende for effektiv DNA-udfældning.

4. Høj saltkoncentration: Den høje saltkoncentration skabt af natriumacetat i opløsningen letter dannelsen af ​​DNA-proteinkomplekser. Disse komplekser er essentielle for den effektive adskillelse af DNA fra andre cellekomponenter.

5. Optimering af DNA-gendannelse: Natriumacetat bidrager til optimering af DNA-genvindingsudbyttet ved at reducere uspecifikke interaktioner mellem DNA og kontaminanter. Korrekt saltkoncentration hjælper med at sikre, at DNA'et udfældes selektivt, hvilket minimerer tabet af DNA under isoleringsprocessen.

6. Kompatibilitet med efterfølgende trin: Natriumacetat er kompatibelt med efterfølgende trin i DNA-isolering og oprensning. Det præcipiterede DNA kan let vaskes, genopløses i passende buffere og bearbejdes yderligere til nedstrømsapplikationer såsom PCR, enzymatiske reaktioner eller sekventering.

Samlet set spiller natriumacetat en afgørende rolle i udfældningen af ​​DNA fra cellelysater under DNA-isolering. Det bidrager til den effektive adskillelse af DNA fra urenheder, opretholdelse af optimale pH-forhold og letter nedstrømsbehandlingen af ​​det isolerede DNA.