1. Tris(hydroxymethyl)aminomethan (Tris-base)
2. Deioniseret vand
3. pH-meter eller pH-indikatorstrimler
4. Analytisk balance
5. Målekolbe (50 ml)
Procedure:
1. Vej 0,6057 gram Tris-base ved hjælp af en analytisk vægt.
Denne beregning kan udføres ved hjælp af formlen:
Masse af Tris-base (g) =Koncentration (mM) x Volumen af opløsning (L) x Molekylvægt af Tris-base (g/mol)
I dette tilfælde:
Masse af Tris-base (g) =20 mM x 0,050 L x 121,14 g/mol =0,6057 g
2. Overfør den vejede Tris-base til en 50 ml målekolbe.
3. Tilsæt en lille mængde deioniseret vand (ca. 30-40 ml) for at opløse Tris-basen.
4. Rør forsigtigt kolben rundt for at blande og opløse Tris-basen fuldstændigt.
5. Kontroller opløsningens pH ved hjælp af et pH-meter eller pH-indikatorstrimler. pH-værdien af en 20 mM Tris-baseopløsning skal være ca. 8,0-8,5.
6. Juster om nødvendigt opløsningens pH ved at tilsætte små mængder saltsyre (HCl) eller natriumhydroxid (NaOH).
Bemærk:Tris base er en svag base, så den vil let opløses i vand. Men hvis du observerer uopløste partikler, kan du forsigtigt opvarme opløsningen for at hjælpe dem med at opløses.
6. Når pH-værdien er justeret, og opløsningen er godt blandet, tilsættes mere deioniseret vand for at bringe det endelige volumen op på 50 ml.
7. Bland grundigt ved at dreje kolben forsigtigt.
Din 20 mM Tris baseløsning er nu klar til brug. Opbevar opløsningen ved stuetemperatur eller køl, hvis det ønskes.