Generelle overvejelser:
* bakteriecellevæg: Bakterier har en cellevæg, som enten kan være gram-positiv eller gramnegativ.
* Gram-positive bakterier: Har et tykt peptidoglycanlag, der let pletter med basale farvestoffer.
* Gram-negative bakterier: Har et tyndere peptidoglycan -lag og en ydre membran, hvilket gør dem mindre permeable til farvestoffer. De kræver ofte specielle farvningsmetoder eller farvestoffer, der kan trænge ind i den ydre membran.
* farvestofafgift:
* Grundlæggende farvestoffer: Positivt ladede (kationiske) og har en tendens til at binde til negativt ladede strukturer som nukleinsyrer og cellevægskomponenter. Eksempler inkluderer methylenblå, krystalviolet og safranin.
* sure farvestoffer: Negativt ladet (anionisk) og har en tendens til at binde til positivt ladede strukturer, såsom proteiner. Eksempler inkluderer eosin og nigrosin.
farvningsmetoder:
* Enkel farvning: Bruger et enkelt farvestof til at visualisere bakteriel morfologi (form og arrangement). Grundlæggende farvestoffer bruges ofte til enkel farvning af bakterier.
* Gramfarvning: En differentiel farvningsmetode, der skelner mellem gram-positive og gram-negative bakterier.
* Primær plet: Crystal Violet (grundlæggende farvestof).
* mordant: Jodopløsning, der danner et kompleks med den primære plet og øger sin affinitet for cellevæggen.
* Decolorizer: Ethanol eller acetone, der fjerner pletten fra gramnegative bakterier, men ikke Gram-positive bakterier.
* tæller: Safranin (grundlæggende farvestof) pletter de gramnegative bakterier lyserøde eller røde.
Derfor:
* til generel enkel farvning: Grundlæggende farvestoffer (positivt ladet) er normalt det bedste valg, da de let binder til bakteriecellekomponenter.
* til gramfarvning: En kombination af grundlæggende farvestoffer (Crystal Violet og Safranin) bruges til at skelne mellem gram-positive og gram-negative bakterier.
Vigtig note: Nogle specialiserede pletter kan bruge sure farvestoffer afhængigt af den specifikke målstruktur i bakterierne.
Overvej altid den specifikke farvningsmetode og målbakterier, når du vælger et passende farvestof.