Hvorfor skal DNA -fragmenter udsættes for en alkalisk opløsning inden hybridisering?
Her er hvorfor:
* alkaliske løsninger Denature DNA: Høje pH-opløsninger (alkalisk) bryder brintbindingerne, der holder de to DNA-tråde sammen, hvilket fører til enkeltstrenget DNA. Selvom dette kan virke nyttigt til hybridisering, ville det også denaturere de sonder, der bruges i processen, hvilket gør dem ineffektive.
* Hybridisering er afhængig af enkeltstrenget DNA: Hybridisering forekommer mellem komplementære enkeltstrengede DNA-molekyler . Imidlertid skal denatureringsprocessen kontrolleres omhyggeligt.
Sådan fungerer processen typisk:
1. DNA denatureres: DNA opvarmes til en høj temperatur (typisk omkring 95 ° C) for at bryde brintbindingerne og adskille trådene.
2. hybridisering: Det denaturerede DNA (mål -DNA) afkøles derefter langsomt, hvilket tillader komplementære strenge af sonder at anneal (hybridisere) til målsekvenserne.
3. alkalisk behandling (valgfrit): * Efter* hybridisering bruger nogle protokoller en mild alkalisk opløsning til at fjerne ubundne sonder.
Derfor bruges alkalisk behandling ikke før hybridisering, men kan bruges i visse trin efter hybridisering til vask og fjernelse af ubundne sonder.
Varme artikler
-
Løsning af batterifrie enheder kortsigtet hukommelsestabNyt tidtagningskredsløb gør det muligt for batterifrie enheder hurtigt at genstarte hurtigt efter strømtab. Kredit:Northwestern University I årtier, forskere har ledt efter et bedre batteri. Nu pr -
Hvordan interstitiel bestilling påvirker højstyrkestålKredit:CC0 Public Domain Materialers ydeevne er stærkt påvirket af deres legeringselementer:Tilføjelse af elementer ud over legeringens grundlæggende sammensætning kan i høj grad påvirke egenskabe -
Smart bulkplast reagerer på lys, temperatur og fugtighedKredit:Unsplash/CC0 Public Domain Forestil dig, at produkter har en længere holdbarhed på grund af smart emballage, at plastikrobotter er drevet af deres miljø, og at tøjet tilpasser sig, mens det -
Denne brintbrændstofmaskine kunne være den ultimative guide til selvforbedringGuosong Zeng, en postdoc i Berkeley Labs Chemical Sciences Division, på arbejde ved at teste et kunstigt fotosynteseapparat lavet af galliumnitrid. Zeng, sammen med Berkeley Labs personaleforsker Fran
- Rumstationer 2 kvinder forbereder sig til den første kvindelige rumvandring
- Gennemsigtigt og fleksibelt batteri til strømproduktion og opbevaring
- Hvordan en smitsom kræft spredes blandt muslinger
- Klasseværelsesaktiviteter efter den videnskabelige metode
- Arbejde Hvordan Obduktioner
- Kystorkaner rundt om i verden intensiveres hurtigere, viser ny undersøgelse