Hvad er funktionen af ​​natriumcitrat i DNA -isolering?

Natriumcitrat spiller en afgørende rolle i DNA -isolering ved at fungere som en chelator , hvilket betyder, at det binder til og fjerner metalioner fra løsning. Dette er vigtigt af flere grunde:

1. Inaktivering af DNASES:

* DNASES er enzymer, der nedbryder DNA. Mange dnaser kræver metalioner som magnesium (mg ²⁺ ) som cofaktorer for deres aktivitet.

* Natriumcitrat binder til disse metalioner, hvilket gør dem utilgængelige for DNaserne, hvilket effektivt hæmmer deres aktivitet og beskytter DNA'et mod nedbrydning.

2. Forebyggelse af DNA -nedbør:

* DNA er negativt ladet, og i nærvær af høje koncentrationer af metalioner kan det udfælde ud af opløsningen.

* Natriumcitratens chelateringshandling forhindrer denne nedbør ved at reducere koncentrationen af ​​frie metalioner, hvilket gør det muligt for DNA at forblive opløst og lettere at isolere.

3. Forbedret lyseffektivitet:

* Nogle DNA -isoleringsprotokoller involverer anvendelse af vaskemidler til Lyse -celler og frigive DNA.

* Natriumcitrat kan hjælpe med at forbedre lyseringseffektiviteten ved at fremme dannelsen af ​​miceller, strukturer, der kan indkapsles og nedbryde cellemembraner.

Generelt bidrager natriumcitrat til en vellykket DNA -isolering af:

* Beskyttelse af DNA mod nedbrydning ved at hæmme DNaser.

* Forebyggelse af DNA -nedbør og sikre dets opløselighed.

* Forbedring af cellelysering og DNA -frigivelse.

Sammenfattende er natriumcitrat et værdifuldt reagens i DNA -isolering ved at sikre integriteten og tilgængeligheden af ​​DNA gennem dets chelerende egenskaber.