Hvad er kemi af Chod-PAP-metodekolesterolmåling?

CHOD-PAP-metoden er en meget anvendt enzymatisk metode til bestemmelse af kolesterolniveauer i blod. Det involverer en række enzymatiske reaktioner, der er koblet til produktionen af ​​et farvet produkt, der måles spektrofotometrisk. Her er en sammenbrud af de involverede nøgleaktioner:

1. Kolesterolesterhydrolyse:

- kolesterolesterase (CE) Hydrolyserer kolesterolestere i frit kolesterol og fedtsyrer.

`` `

Kolesterolester + H2O → kolesterol + fedtsyre

`` `

2. Kolesteroloxidation:

- kolesteroloxidase (chod) Oxiderer frit kolesterol til Cholest-4-en-3-one og hydrogenperoxid (H2O2).

`` `

Kolesterol + O2 → Cholest-4-en-3-one + H2O2

`` `

3. Peroxidase -reaktion:

- peroxidase (pod) Katalyserer reaktionen mellem H2O2 og et kromogent underlag, 4-aminophenazon (4-AP) , i nærvær af en phenol, typisk phenol 4-aminoantipyrine (PAP) . Dette resulterer i dannelsen af ​​et farvet quinoneiminfarvestof.

`` `

H2O2 + 4-AP + PAP → Quinoneimine Dye + H2O

`` `

Nøglepunkter:

* koblede reaktioner: Reaktionerne er koblet, hvilket betyder, at produktet af den ene reaktion fungerer som underlaget for det næste. Dette sikrer, at dannelsen af ​​det farvede produkt er direkte proportional med den indledende kolesterolkoncentration.

* spektrofotometrisk måling: Intensiteten af ​​det farvede produkt måles under anvendelse af et spektrofotometer ved en bestemt bølgelængde. Absorbansen er direkte proportional med kolesterolkoncentrationen.

* Kalibrering: Metoden kræver en kalibreringskurve ved hjælp af kendte kolesterolstandarder for at relatere absorbanslæsningerne til kolesterolkoncentrationer.

Fordele ved Chod-PAP-metoden:

* høj følsomhed og nøjagtighed

* relativt enkel og hurtig

* bredt tilgængelig og standardiseret

Ulemper ved Chod-PAP-metoden:

* kan påvirkes af lipæmi (høje triglyceridniveauer) og hæmolyse

* kræver specialiserede reagenser og udstyr

Generelt er CHOD-PAP-metoden en pålidelig og nøjagtig metode til måling af kolesterolniveauer i blod. Det er vidt brugt i kliniske laboratorier og betragtes som guldstandarden til kolesterolbestemmelse.