Hvordan forbereder du 0,1 m Tris HCl -puffer af pH 8?

Materialer:

* Tris -base (Tris (hydroxymethyl) aminomethan)

* 1 M HCL -løsning

* Deioniseret vand

* pH -meter eller pH -indikatorpapir

* Gradueret cylinder

* Bægerglas

* Omrøring af stang

Procedure:

1. Beregn mængden af ​​Tris -base:

* Tris har en molekylvægt på 121,14 g/mol.

* For at forberede 1 liter 0,1 m Tris -opløsning har du brug for:

* 0,1 mol/l * 121,14 g/mol =12,114 g Tris -base

* Juster beløbet proportionalt, hvis du har brug for en anden mængde buffer.

2. Opløs Tris -basen:

* Vej den beregnede mængde Tris-base og opløs den i ca. 800 ml deioniseret vand i et 1-liters bægerglas.

* Rør grundigt for at sikre fuldstændig opløsning.

3. Juster pH:

* ved hjælp af en pH -meter: Tilsæt langsomt 1 M HCl -opløsning til Tris -opløsningen, mens pH -meter kontinuerligt overvåger en pH -meter. Rør godt efter hver tilføjelse.

* Brug af pH -indikatorpapir: Tilsæt små mængder HCI, indtil den ønskede pH på 8,0 er nået, som angivet med pH -papiret.

4.

* Når den ønskede pH er opnået, tilsættes deioniseret vand for at bringe det endelige volumen til 1 liter.

5. Kontroller og juster pH:

* Kontroller pH -værdien igen med en pH -meter eller indikatorpapir og foretager alle mindre justeringer med HCI eller en fortyndet NaOH -opløsning, hvis nødvendigt.

Vigtige noter:

* sikkerhed: Tris -base er mildt sagt irriterende for huden og øjnene. Bær passende beskyttelsesbriller og handsker under håndtering.

* pH meter kalibrering: Sørg for, at din pH -meter er korrekt kalibreret inden brug.

* Temperatureffekter: PH af en Tris -puffer er let temperaturafhængig. Vær opmærksom på dette, hvis du har brug for at bruge bufferen ved temperaturer, der er markant forskellige fra kalibreringstemperaturen.

* opbevaring: Opbevar den forberedte puffer ved stuetemperatur eller i et køleskab til udvidet opbevaring.

Yderligere tip:

* pH -justering: Det er typisk lettere at justere pH -ned ved at tilføje HCL end at hæve den ved at tilføje NaOH.

* præcision: En pH -meter giver dig en mere præcis læsning end pH -papir.

* Flere buffere: Hvis du har brug for at forberede flere buffere, er det mere effektivt at fremstille en koncentreret stamopløsning af Tris og fortynde den efter behov.

Fortæl mig, hvis du har flere spørgsmål.