Mestring af fortyndinger:Præcise teknikker til kemi og mikrobiologi

Af bidragyder
Opdateret 30. august 2022

At mestre kunsten at fortynde er afgørende for alle, der arbejder inden for kemi eller mikrobiologi. Nøjagtige fortyndinger forbedrer laboratoriepræcisionen, reducerer variabiliteten og fører i sidste ende til mere pålidelige data. Den følgende trinvise vejledning er baseret på bedste praksis i laboratoriet og sikkerhedsstandarder, hvilket sikrer, at du udfører hver fortynding med tillid og nøjagtighed.

Trin 1 – Vælg det rigtige glasvarer

Til kemi- eller analytiske fortyndinger, brug volumetriske glasvarer såsom en volumetrisk pipette og en målekolbe. Inden for mikrobiologi er serologiske pipetter og graduerede cylindre passende til at overføre små volumener, samtidig med at opløsningen kan tælles.

Trin 2 – Start med en veldefineret aktie

Begynd med en flydende stamopløsning – enten en ren væskeprøve eller en opløsning fremstillet af et pulver eller en væske, der er blevet fortyndet til en kendt koncentration.

Trin 3 – Udfør en kemifortynding

Mål det nøjagtige volumen af lager ved hjælp af en volumetrisk pipette og overfør den til en målekolbe, der rummer det ønskede slutvolumen. Til en 1:100 fortynding pipetteres 1,0 mL lager i en 100 mL kolbe og tilsæt 99 mL fortyndingsmiddel for at nå i alt 100 mL.

Trin 4 – Udfør en mikrobiologisk fortynding

Overfør stamopløsningen med en serologisk pipette til et bægerglas, og tilsæt derefter fortyndingsmidlet ved hjælp af en målecylinder. Til en 1:100 fortynding tilsættes 1 ml lager til 100 ml fortyndingsmiddel, hvilket giver et slutvolumen på 101 ml.

Trin 5 – Vælg det korrekte fortyndingsmiddel

Brug det fortyndingsmiddel, der er specificeret til din metode. Inden for mikrobiologi omfatter almindelige valg medier, buffere og sterilt vand. I kemi kan fortyndingsmidler være opløsningsmidler, syrer, baser eller deioniseret vand, afhængigt af analytten.

Trin 6 – Bland grundigt under overførsel

Rør kolben halvvejs gennem tilsætningen af fortyndingsmiddel for at sikre homogenitet, og fortsæt derefter med tilsætningen, indtil det endelige volumen er nået.

Trin 7 – Tilføj det endelige volumen for dråbe

For de sidste par milliliter skal du bruge en dråbe til at tilføje fortyndingsmiddel i enkelte dråber, hvilket sikrer, at det endelige volumen måles nøjagtigt.

Trin 8 – Læs menisken korrekt

Hold kolben eller bægeret i øjenhøjde, og aflæs den nederste kant af menisken – den konkave kurve, der dannes af væskeoverfladen. Juster dette punkt med skalaen på beholderen for præcis måling.

Trin 9 – Endelig homogenisering

Indsæt en magnetisk omrørerstang i fortyndingen, og anbring beholderen på en røreplade, eller, hvis en røreplade ikke er tilgængelig, stop kolben, roter rundt og vend den på hovedet gentagne gange for at blande.

Trin 10 – Udfør serielle fortyndinger

Når der kræves et stort slutvolumen, udføres seriefortyndinger. For en 1:10.000 fortynding skal du først lave en 1:100 fortynding (1 ml lager i 100 ml fortyndingsmiddel). Overfør derefter 1 ml af denne mellemopløsning til en anden 100 ml fortynder. Den kumulative effekt giver en fortynding på 1:10.000.

Trin 11 – Håndter syrefortyndinger med omhu

Tilsæt altid syre til vand, ikke omvendt, for at undgå eksoterme reaktioner. Begynd med at tilsætte en lille mængde vand til kolben, før syren indføres, og fortynd derefter til det nødvendige volumen.

Ting påkrævet

• Volumetrisk pipette og kolbe med prop
• Serologisk pipette
• Klassificeret cylinder
• Bægerglas
• Pipettepære
• Dropper
• Magnetisk rørestang og plade

TL;DR (for lang; læste ikke)

Mærk fortyndinger tydeligt, undgå at erstatte væske tabt under blanding, og tilsæt altid syre til vandet for at sikre sikkerhed og nøjagtighed.

Advarsel

Tilsætning af vand til syre kan forårsage voldsomme reaktioner og alvorlige skader. Brug en pipettepære, munden aldrig pipette, og tilsæt altid syre til vandet.