Sådan beregner du CFU fra fortynding

CFU står for Colony Forming Units, en term i mikrobiologi bruges til at kvantificere, hvor mange bakterier der er til stede i en løsning. Afhængig af koncentrationen af ​​din prøve skal du udføre flere fortyndinger og plader de forskellige prøver på petriskåle. Hvis der er for mange bakteriekolonier, vil de være svære at tælle, og hvis der er for få, kan prøven ikke være repræsentativ. Det er generelt en god ide at plader den oprindelige opløsning, derefter en 1/10 fortynding (1 del opløsning, 9 dele saltvand), en 1/100 fortynding og muligvis en 1/1000 fortynding.

Beregning af CFU fra Bakteriefortynding

Udfør en foreløbig tælling af hver skål, når bakterierne har haft tid til at inkuberes, normalt en eller to dage. Du vil kun tælle individuelle kolonier, som skal være forskellige, isolerede prikker, ikke en hel klump af forskellige kolonier, der vokser sammen. Vælg pladen, der har mere end 30 af disse kolonier, men mindre end 300.

Tæl antallet af individuelle kolonier. Dette er CFU-nummeret af din fortynding - du skal udføre en simpel beregning for at bestemme CFU for den oprindelige prøve. I dette eksempel anvendes en hypotetisk plade indeholdende 46 kolonier.

Bestem størrelsen af ​​den fortynding du brugte. Ideelt set mærkede du petriskålene på forhånd. I dette eksempel kan du blande 1 ml bakteriekultur med 99 ml saltvand. Dette er en fortynding på 1/100.

Multiplicér graden af ​​fortyndingen med det beløb, du faktisk har plettet. Hvis du i dette eksempel pletterede 0,1 ml af din 1/100 fortynding på agar, multiplicerer du 0,1 x 1/100, med et resultat på 1/1000 eller 0.001.

Fordel CFU af fortyndingen (antallet af kolonier du tællede) med resultatet fra trin 4. For dette eksempel vil du opdele 46 ved 1/1000, hvilket er det samme som at formere med 1.000. Resultatet er 46.000 CFU i den oprindelige prøve.