Chad Baker/Photodisc/Getty Images
Et gen indeholder planen for et protein. Ved at indsætte et menneskeligt gen i bakterier kan videnskabsmænd udnytte bakteriel metabolisme til at syntetisere enorme mængder af det kodede protein. Insulin, der er afgørende for patienter med diabetes, er et glimrende eksempel:rekombinant human insulin produceres i manipulerede bakteriekulturer, hvilket giver en sikker og effektiv forsyning til terapeutisk brug.
Bakterier bærer plasmider - små cirkulære DNA-molekyler - der er i stand til at acceptere fremmede DNA-fragmenter. Det menneskelige genom kan fragmenteres og indsættes i plasmider, som hver især derefter klones ind i bakterieceller. Hver koloni giver millioner af identiske bakterier, der indeholder et specifikt genomisk segment, hvilket skaber et kryogent "bibliotek", hvor hvert hætteglas opbevarer et defineret stykke menneskeligt DNA.
Fordi bakteriel vækst er upåvirket af mutationer i det indsatte gen, kan forskere indføre præcise ændringer - punktmutationer, deletioner eller indsættelser - i plasmidet. Det resulterende mutante gen udtrykkes i bakterier, hvilket muliggør hurtig amplifikation af et mangfoldigt bibliotek af varianter. Disse muterede gener kan senere genindføres i humane celler for at vurdere funktionelle konsekvenser.
Plasmider kan konstrueres til at co-udtrykke en reporter såsom grønt fluorescerende protein (GFP). Ved at fusionere det humane protein af interesse til GFP opnår forskerne en fluorescensmærket konstruktion. Efter produktion i bakterier og isolering af plasmider leveres fusionsgenet til humane celler, hvilket muliggør realtidsvisualisering af proteinlokalisering og dynamik under et fluorescensmikroskop.
Varme artikler



