Teknik til at adskille bakterier i en blandet kultur

Mikrobiologer, genetikere og molekylærbiologer bruger bakteriekulturer til at opdage livets hemmeligheder. Mikrobiologer studerer bakterier for at opdage nye antibiotika til behandling af infektioner. Genetikere bruger bakterier til at afgøre, om kemikalier kan have kræftfremkaldende egenskaber. Molekylærbiologer studerer de biokemiske veje i cellulære processer for at forstå funktionerne af enzymer, vi har til fælles med bakterier. Så forskellige som studierne, isolerer alle tre videnskaber bakteriekulturer med samme teknik: agarpladestriping.

Microbe Basics

Mikrober er enkeltcellede organismer som bakterier og svampe. Disse organismer reproducerer hurtigt og er nemme at vokse, hvilket gør dem særligt nyttige til at studere. Når en potentielt ny mikrobe opdages i naturen, er en prøve placeret i et vækstmedium kaldet en "bouillon". Bøtter består af steriliseret vand, salte, sukkerarter og andre næringsstoffer, som vil fremme hurtig bakterievækst i en kolbe under inkubation. Men oftere end ikke, vil buljongen indeholde mere end en type bakterier. For at isolere en enkelt bakterie spred forskeren en lille prøve af bouillon over en halvfast agarplade ved hjælp af en mikrobiel teknik kaldet "streaking".

Agarplader

Agarplader er halvgennemsigtige , halvfaste geler bestående af tang og specifikke koncentrationer af næringsstoffer. Agarens anvendelighed ligger i, at det giver en glat, blød overflade til dyrkning af bakterier. Når en videnskabsmand placerer en enkelt bakterie på agar, vil den reproducere sig ved at fordoble sig selv tusindvis af tid og vil fremstå som en lille koloni af enkeltceller.

Bakteriestrækkerværktøjer

Bakteriestrikker kræver tre værktøjer : en agarplade, en alkoholbrænder og en trådsløjfe. Agarpladen er vækstmediet, hvortil bakterierne overføres efter vækst i bouillon. Alkoholbrænderen er en lille, alkoholfyldt lampe til sterilisering af trådsløjfen - et langt slank håndtag med en lille sløjfe af brandfast tråd fastgjort i den ene ende. Sløjfen vil holde et lille dråbe bakteriefyldt bouillon, når du overfører bakterierne fra bouillon til agarpladen.

Bakteriestrækkerproces

Strikkende bakterier på tværs af en agarplade er enkle, men du skal udføre dette trin korrekt, eller du vil ikke isolere separate kolonier. Varm løkken over alkoholbrænderen for at sterilisere tråden, og dypp derefter spidsen af ​​løkken i bouillon. Strik loopspidsen frem og tilbage flere gange over en fjerdedel af agarpladen. Steriliser sløjfen igen og strejf over og vinkelret på de første striber. Flyt løkken frem og tilbage et par gange over en ny del af pladen. Steriliser spidsen. strik let over den sidste strimmede sektion en gang og bevæg sløjfen frem og tilbage flere gange. Strimlen fortynder den første dråbe bouillon til et punkt, hvor de sidste striber vil indeholde enkeltkolonier. Placer pladen i en inkubator eller på en bordplade ved stuetemperatur, og vent på, at kolonierne vokser natten over. Enkeltkolonier i sidste stribe bliver isolerede kolonier af en enkelt bakterie.