Hvordan isolerer jeg bakterier fra jord?

Isolering af bakterier fra jord er et vigtigt første skridt i mange mikrobiologiske eksperimenter. Når de er isoleret, kan bakterier analyseres yderligere for at bestemme ting, som deres art og deres funktion i jordmiljøet. Selv en lille mængde jord kan indeholde millioner af bakterier, hvilket gør det nødvendigt at fortynde en jordprøve inden isolering af bakterier fra prøven.

Mål 100 ml. destilleret vand i den graduerede cylinder og tilsæt den til den sterile flaske.

Afvej 1 g af jordprøven og tilsæt den til flasken destilleret vand. Tæt tæt på flasken og ryst den for at blande opløsningen grundigt.

Mærk de sterile reagensglas "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5" og "10 ^ - 6." Tilsæt 9 ml destilleret vand til hvert af rørene ved hjælp af en af ​​pipetterne.

Overfør 1 ml af opløsningen i flasken til røret mærket "10 ^ -3" ved brug af en ny pipette. Løsn røret og hvirvl det forsigtigt, indtil opløsningen er godt blandet.

Overfør 1 ml af opløsningen i testrøret "10 ^ -3" til "10-4" -røret med en ny pipette. Læg "10 ^ -4" -røret og hvirv for at blande. Gentag denne metode for at overføre opløsningen fra "10 ^ -4" -røret til "10 ^ -5" -røret og derefter fra "10 ^ -5" -røret til "10 ^ -6" -røret.

Plad tre prøver hver fra "10 ^ -4", "10 ^ -5" og "10 ^ -6" rørene. Brug en ny pipette til at overføre 1 ml opløsning fra røret til en petriplade. Tilsæt ca. 15 ml nærings agar til pladen; Læg derefter låget på pladen og vrid forsigtigt, så agar dækker bunden af ​​pladen.

Lav en kontrolplade ved at sætte 1 ml destilleret vand i en petriplade med en ny pipette. Tilføj agar; læg låget på og hvirv pladen.

Lad Petri-pladerne stå oprejst, indtil agaret er indstillet. Derefter drejes pladerne og inkuberer dem - enten i en inkubator eller ved stuetemperatur - i så lidt som 24 timer og op til fem dage.

Fjern pladerne fra inkubatoren efter den ønskede inkubationstid. Tæl bakteriekolonierne på plader, der indeholder ca. 30 til 300 kolonier. Brug en permanent markør til at markere de kolonier, du allerede har talt for at undgå at tælle de samme kolonier to gange.

Opdele antallet af kolonier, der tælles med fortyndingen "10 ^ -4," "10 ^ -5 "eller" 10 ^ -6 "- af jordopløsningen for hver plade. Find antallet af kultiverbare bakterier i det oprindelige gram jord ved at middelværdige resultaterne fra hver tællerplade.

TL; DR (for længe, ​​ikke læst)

Følg aseptiske laboratorieteknikker overalt proceduren.

Advarsel

For at forhindre forurening og mulig infektion fra bakterierne, skal du sørge for at bortskaffe alle Petri-plader, jordløsninger og pipetter korrekt.

Kun denne procedure måler dyrkelige bakterier. Ifølge Cornell University vil mellem 90 og 99 procent af jordbakterier ikke vokse på nærings agar.