For at måle nulfejlen skal mikroskopet være fokuseret på en fast genstand, såsom et scenemikrometer eller et objektglas med et indskrevet mærke. Derefter justeres mikrometer- eller vernier-skalaen, indtil trådkorset flugter nøjagtigt med referencepunktet. Aflæsningen på skalaen på dette punkt er nulfejlen.
Det er vigtigt at bestemme og korrigere nulfejlen, før der foretages målinger med rejsemikroskopet. Dette kan gøres ved at justere mikroskopets optiske komponenter eller mikrometer/vernier skalaen indtil nulfejlen er nul. At ignorere eller ikke korrigere for nulfejlen kan introducere unøjagtigheder og systematiske fejl i de målinger, der tages med mikroskopet.
For at opnå præcise målinger er det vigtigt regelmæssigt at kontrollere og kalibrere rejsemikroskopet for at minimere nulfejl og sikre pålidelige resultater.