1. Påvisning af fremmed DNA:
- Bakterier overvåger konstant deres intracellulære miljø for tilstedeværelsen af fremmed genetisk materiale, såsom viralt DNA eller RNA.
2. CRISPR RNA (crRNA) produktion:
- Når der påvises en viral invasion, bliver specifikke segmenter af det fremmede DNA kopieret og integreret i bakteriens eget DNA som CRISPR spacere.
- Disse CRISPR spacere transskriberes derefter til små CRISPR RNA'er (crRNA'er), der hver indeholder en kort sekvens komplementær til en region i det fremmede DNA.
3. Kaskade kompleks samling:
- CrRNA'erne danner komplekser med Cas-proteiner, en gruppe proteiner, der er essentielle for CRISPR-Cas-immunitet.
- Disse komplekser er kendt som Cascade (CRISPR-associeret kompleks til antiviralt forsvar) eller CRISPR-Cas effektorkomplekser.
4. Målgenkendelse og binding:
- Cascade-komplekset scanner det intracellulære miljø for tilstedeværelsen af virale nukleinsyrer.
- Når en crRNA-sekvens matcher en komplementær sekvens i det virale DNA eller RNA, binder komplekset til målet.
5. Nukleaseaktivitet:
- Når først det er bundet til målet, udløser Cascade-komplekset nukleaseaktivitet, typisk medieret af Cas-nukleaser såsom Cas9 eller Cas12.
- Disse nukleaser genererer dobbeltstrengede DNA-brud (DSB'er) eller enkeltstrengede DNA-hak på målstedet, hvilket effektivt spalter de virale nukleinsyrer.
6. Interferens og nedbrydning:
- Spaltningen af viralt DNA eller RNA forstyrrer viral replikation og transkription, hvilket interfererer med virussens evne til at formere sig i bakteriecellen.
- De fragmenterede virale nukleinsyrer nedbrydes yderligere af cellulære exonukleaser og nukleaser, hvilket fører til nedbrydning og clearance af den invaderende virus.
Ved at anvende CRISPR-Cas-systemer kan bakterier genkende og målrette mod specifikke virussekvenser, inducere målrettet DNA-spaltning og i sidste ende eliminere den virale infektion. Disse immunforsvarsmekanismer spiller en afgørende rolle i at beskytte bakterier mod forskellige virale trusler og bidrager til den samlede overlevelse og tilpasning af bakteriepopulationer.