Hvordan analyseres kromosomer i en karyotype?

1. Prøveforberedelse:

- Blod eller andre vævsprøver udtages fra individet.

- Hvide blodlegemer er isoleret fra prøven.

- Cellerne dyrkes i laboratoriemiljøer for at stimulere celledeling.

2. Cellehøst og -fiksering:

- På det passende stadie af celledeling (metafase) høstes cellerne og behandles med en hypotonisk opløsning for at svulme op.

- De hævede celler fikseres derefter med et fikseringsmiddel, typisk en blanding af kemikalier som methanol og eddikesyre, for at bevare de cellulære strukturer.

3. Forberedelse af dias:

- Faste celler lægges ned på objektglas og spredes for at skabe et monolag af kromosomer.

- Objektglassene lufttørres eller opvarmes for at forbedre vedhæftningen af ​​kromosomer til glasoverfladen.

4. Farvning:

- En farvningsteknik, såsom Giemsa eller trypsin-Giemsa, bruges til at farve kromosomerne.

- Pletterne binder til specifikke områder af kromosomerne, hvilket gør det muligt at identificere karakteristiske båndmønstre.

5. Båndmønstre:

- Båndmønstrene på kromosomerne er unikke for hvert kromosompar og giver en visuel repræsentation af kromosomstrukturen og organiseringen.

- Disse mønstre bruges til kromosomidentifikation og -analyse.

6. Karyotyping:

- De farvede kromosomer er arrangeret og organiseret i et standardformat i henhold til deres størrelse, form og båndmønstre.

- Dette organiserede arrangement skaber en karyotype, som i det væsentlige er en fotografisk repræsentation af et individs kromosomkomplement.

7. Kromosomanalyse:

- Karyotyper undersøges i mikroskop af cytogenetikere eller andre uddannede fagfolk.

- De analyserer antallet, strukturen og eventuelle abnormiteter i kromosomerne.

- Specifikke numeriske eller strukturelle variationer (f.eks. duplikationer, deletioner, translokationer) kan detekteres og studeres mere detaljeret.

8. Genetiske markører og FISK:

- Specialiserede teknikker som fluorescerende in situ hybridisering (FISH) kan bruges til yderligere at undersøge specifikke genetiske loci eller identificere kromosomale omlejringer.

- FISH involverer brug af fluorescerende prober, der binder til specifikke DNA-sekvenser, hvilket muliggør visualisering af specifikke kromosomregioner eller gener af interesse.

9. Fortolkning og rapportering:

- Baseret på analysen af ​​karyotypen og eventuelle yderligere anvendte teknikker, genereres en cytogenetisk rapport.

- Rapporten beskriver kromosomfundene, identificerer eventuelle kromosomafvigelser eller -variationer og giver relevant information til genetisk rådgivning, diagnosticering og behandling af genetiske lidelser.

Det er vigtigt at bemærke, at karyotypeanalyse er et specialiseret område, og fortolkningen af ​​kromosomabnormaliteter kræver ekspertise og viden om human genetik og cytogenetik.