Hvad er funktionen af ​​phosphatbuffer i DNA -isolering?

* Beskyttelse af DNA -integritet: DNA er mest stabilt ved en let alkalisk pH (ca. 7-8). Phosphatbuffer hjælper med at opretholde denne pH ved at fungere som en puffer og modstå ændringer i surhedsgrad. Dette er vigtigt, fordi ekstreme pH -svingninger kan skade DNA -molekylet, hvilket fører til nedbrydning eller fragmentering.

* Forbedring af enzymaktivitet: Nogle enzymer anvendt i DNA -isolering, såsom proteinase K, fungerer optimalt ved en bestemt pH. Phosphatbuffer sikrer, at pH forbliver inden for det optimale interval for disse enzymer, hvilket giver dem mulighed for effektivt at nedbryde proteiner og frigive DNA.

* Forebyggelse af DNA -nedbør: Phosphatbuffer hjælper også med at forhindre nedbør af DNA ved at opretholde dets opløselighed. Dette er vigtigt, fordi DNA kan udfælde ud af opløsningen under sure forhold, hvilket gør det vanskeligt at udtrække.

* letter binding til silicamembraner: I nogle DNA -isoleringsteknikker anvendes en fosfatbuffer i kombination med en silicamembran til at binde DNA. Fosfationerne i bufferen hjælper med at neutralisere den negative ladning på DNA -molekylet, hvilket gør det mere sandsynligt at binde til silica.

Kortfattet: Phosphatbuffer spiller en vigtig rolle i DNA -isolering ved at beskytte DNA -integritet, sikre optimal enzymaktivitet, forhindre nedbør og lette binding til silicamembraner. Denne kombination af handlinger sikrer effektiv DNA-ekstraktion og høj kvalitet.